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鈣熒光探針 Fluo 3-AM
貨號：F8840
規格：100ug/1mg
CAS：121714-22-5
別名 : 鈣熒光探針 鈣離子探針 
分子式 : C51H50Cl2N2O23 
分子量 : 1129.85 
儲存條件 : -20°C干燥避光保存，有效期12個月 
純度 : ≥90%(HPLC) 
外觀（性狀） :  紅色粉末 
單位 : 瓶

Fluo-3AM的理化(hua)性質

    吸收(shou)波長/發(fa)射波長：506nm /526nm(低/高鈣)

    建議使用DMSO作為(wei)溶媒。在(zai)溶解(jie)前，FLUO-3AM和DMSO均須放置室溫。溶解(jie)過程(cheng)可(ke)能會(hui)比(bi)較慢(man)。用無水(shui)的DMSO溶解(jie)的FLUO-3AM長期保存，應嚴格密封，并保存于-20度。使用前，將保存液放置室溫后再打開。可(ke)避免(mian)AM探針在(zai)長期的保存過程(cheng)中水(shui)解(jie)。

Fluo-3AM的工作原(yuan)理(li)

    FLUO-3廣泛(fan)用(yong)于長(chang)(chang)(chang)波(bo)長(chang)(chang)(chang)的(de)(de)(de)熒光(guang)鈣(gai)(gai)指(zhi)示劑。其在506NM處(chu)被吸收，可(ke)以(yi)(yi)被氬離子(zi)激光(guang)的(de)(de)(de)488nm激發(fa)(fa)光(guang)激發(fa)(fa)，便于檢測。FLUO-3在沒有(you)同鈣(gai)(gai)結(jie)合的(de)(de)(de)情(qing)況下，無(wu)熒光(guang)產(chan)生。但是(shi)，在與鈣(gai)(gai)結(jie)合后，熒光(guang)（526nm）增強少40倍。Fluo-3 AM是(shi)一種可(ke)以(yi)(yi)穿透細(xi)胞膜(mo)的(de)(de)(de)熒光(guang)染料。Fluo-3 AM的(de)(de)(de)熒光(guang)非常弱，其熒光(guang)不會隨鈣(gai)(gai)離子(zi)濃(nong)度升高而增強。Fluo-3 AM進(jin)入細(xi)胞后可(ke)以(yi)(yi)被細(xi)胞內(nei)(nei)的(de)(de)(de)酯酶剪(jian)切形成Fluo-3，從而被滯留在細(xi)胞內(nei)(nei)。Fluo-3可(ke)以(yi)(yi)和鈣(gai)(gai)離子(zi)結(jie)合，結(jie)合鈣(gai)(gai)離子(zi)后可(ke)以(yi)(yi)產(chan)生較強的(de)(de)(de)熒光(guang)，大激發(fa)(fa)波(bo)長(chang)(chang)(chang)為(wei)506nm，大發(fa)(fa)射波(bo)長(chang)(chang)(chang)為(wei)526nm。實際檢測時推薦使(shi)用(yong)的(de)(de)(de)激發(fa)(fa)波(bo)長(chang)(chang)(chang)為(wei)488nm左右，發(fa)(fa)射波(bo)長(chang)(chang)(chang)為(wei)525-530nm。

Fluo-3AM的應用

1、過程概(gai)述(shu)

     用于細(xi)胞內鈣離子檢(jian)測時，Fluo-3 AM的(de)(de)常用濃度(du)為5μM。通常用含有5μM的(de)(de)Fluo-3 AM的(de)(de)適當(dang)(dang)溶液(ye)和細(xi)胞一起在37℃孵育(yu)30-60分鐘進行(xing)熒光探(tan)針裝載，隨(sui)后適當(dang)(dang)洗滌，洗滌后可以考慮適當(dang)(dang)再孵育(yu)20-30分鐘以確(que)保(bao)Fluo-3 AM在細(xi)胞內*轉變成Fluo-3。然后在流式細(xi)胞儀上(shang)進行(xing)檢(jian)測。

2、Fluo-3AM使(shi)用(yong)液的配置

     100ug的Fluo-3AM，分(fen)子量是1219.9。按實(shi)際需要的摩(mo)爾濃(nong)度折(zhe)算，無水DMSO溶(rong)解。一(yi)般(ban)配(pei)置成1~5mM的DMSO儲存(cun)液。如(ru)出現難溶(rong)現象，可以用20%的F127的DMSO溶(rong)液助溶(rong)。

相關文獻：

《Epigenetically upregulated oncoprotein PLCE1 drives esophageal carcinoma angiogenesis and proliferation via activating the PI-PLCε-NF-κB signaling pathway and VEGF-C/ Bcl-2 expression》 作者:Yunzhao Chen, Dandan Wang, Hao Peng, Xi Chen, Xueping Han, Jie Yu, Wenjie Wang, Lirong Liang, Zheng Liu, Yi Zheng, Jianming Hu, Lan Yang, Jun Li, Hong Zhou, Xiaobin Cui and Feng Li 期刊:Molecular Cancer 影響因子:10.679 PMID:30609930、
 

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