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甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

操作步驟：

一、 TG 的提取(qu)：

1、 組織：按照組織質量(liang)（g）：試(shi)劑(ji)一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約(yue)0.1g組織，加入1mL試(shi)劑(ji)一）進行冰浴勻漿(jiang)，8000g，4℃離心10min，取上清待測。

2、 細(xi)胞(bao)(bao)、細(xi)菌：先收(shou)集 400-500 萬(wan)細(xi)胞(bao)(bao)或(huo)細(xi)菌到離心(xin)管內(nei)，棄(qi)上清，加 1mL 試劑一，超聲波破碎 1min（強度 20％，超聲 2s，停(ting) 1s），8000g， 4℃離心(xin) 10min，取上清待測。

3、 血清（漿）等液體樣(yang)品(pin)：直接測定。

二、 測定操作：

1. 分光光度計預熱 30min，調節波長到 420 nm，蒸餾水調零。

2. 水浴鍋預熱(re)到(dao) 65℃。空白管(guan)(guan)(guan)(guan) 標準管(guan)(guan)(guan)(guan) 測定管(guan)(guan)(guan)(guan)雙(shuang)蒸水（μL） 40 標準液（μL） 40 TG 待測液（μL） 40 試(shi)(shi)劑(ji)一（μL） 125 125 125 試(shi)(shi)劑(ji)二（μL） 25 25 25 加試(shi)(shi)劑(ji)一后充分混勻，再加試(shi)(shi)劑(ji)二，劇烈振(zhen)蕩(dang) 30s，靜置，待分層(ceng)(ceng)后取上層(ceng)(ceng)溶液 30μL，置于新的 EP 管(guan)(guan)(guan)(guan)中。

3．甘油三酯含量(liang)測定(ding)：空(kong)白管(guan)(guan) 標準管(guan)(guan) 測定(ding)管(guan)(guan)上(shang)層溶液(ye)（μL） 30 30 30 試(shi)(shi)劑(ji)(ji)三 （μL） 100 100 100 試(shi)(shi)劑(ji)(ji)四（μL） 30 30 30 充分混(hun)勻，65℃水浴(yu) 3min 試(shi)(shi)劑(ji)(ji)五（μL） 100 100 100 試(shi)(shi)劑(ji)(ji)六(liu)（μL） 100 100 100 充分混(hun)勻，65℃水浴(yu) 15min 取出 200μL 于微量(liang)石英比色皿/96 孔板測定(ding) 420nm 處吸光度，記(ji)為 A 空(kong)，A 標和 A 測。注意(yi)：空(kong)白管(guan)(guan)和標準管(guan)(guan)只需測定(ding)一(yi)次。

甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒

a.使用微(wei)量石英比色皿測(ce)定的計算公式(shi)如下

1. 血(xue)清（漿）中甘油三酯含(han)量(liang)： TG 含(han)量(liang)（mg/dL）=C 標(biao)準品(pin)×（A 測(ce)－A 空）÷（A 標(biao)－A 空）×100 mL =100×（A 測(ce)－A 空）÷（A 標(biao)－A 空） C 標(biao)準品(pin)：1mg/mL；100mL：血(xue)清體積，1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯(zhi)含(han)量： (1)按樣(yang)本蛋(dan)(dan)白濃(nong)度(du)(du)計(ji)算 TG 含(han)量（mg/ mg prot）= C 標(biao)準(zhun)品(pin)(pin)(pin)×（A 測－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)(kong)）÷Cpr =（A 測－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)(kong)）÷ Cpr (2)按樣(yang)本質量計(ji)算 TG 含(han)量（mg/ g）=C 標(biao)準(zhun)品(pin)(pin)(pin)×（A 測－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)(kong)）÷W =（A 測－A 空(kong)(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)(kong)）÷ W C 標(biao)準(zhun)品(pin)(pin)(pin)：1mg/mL ；Cpr：樣(yang)本蛋(dan)(dan)白濃(nong)度(du)(du)，mg/mL；W：樣(yang)本鮮(xian)重，g/mL

3. 細胞(bao)、細菌(jun)中(zhong)甘油三酯(zhi)含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 標(biao)準品(pin)×（A 測－A 空）÷（A 標(biao)－A 空）÷細菌(jun)或細胞(bao)（104 cell /mL） =（A 測－A 空）÷（A 標(biao)－A 空）÷細菌(jun)或細胞(bao)（104 cell /mL） C 標(biao)準品(pin)：1mg/mL。

b.使用 96 孔板測定的計算公式如下

1. 血清（漿）中甘油三酯含(han)量(liang)： TG 含(han)量(liang)（mg/dL）=C 標(biao)準品×（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)）×100 mL =100×（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標(biao)－A 空(kong)） C 標(biao)準品：1mg/mL；100mL：血清體(ti)積，1dL=100 mL。

2. 組織(zhi)中甘油(you)三酯含(han)(han)量： (1)按(an)樣(yang)本蛋(dan)白濃(nong)度(du)計(ji)算 TG 含(han)(han)量（mg/ mg prot）= C 標準(zhun)品×（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標－A 空(kong)）÷Cpr =（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標－A 空(kong)）÷ Cpr (2)按(an)樣(yang)本質量計(ji)算 TG 含(han)(han)量（mg/ g）=C 標準(zhun)品×（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標－A 空(kong)）÷W =（A 測(ce)－A 空(kong)）÷（A 標－A 空(kong)）÷ W C 標準(zhun)品：1mg/mL ；Cpr：樣(yang)本蛋(dan)白濃(nong)度(du)，mg/mL；W：樣(yang)本鮮(xian)重，g/mL

3. 細(xi)胞、細(xi)菌中甘油三酯含(han)量(liang)： TG 含(han)量(liang)（mg/104 cell）=C 標(biao)準品×（A 測－A 空）÷（A 標(biao)－A 空）÷細(xi)菌或(huo)細(xi)胞（104 cell /mL） =（A 測－A 空）÷（A 標(biao)－A 空）÷細(xi)菌或(huo)細(xi)胞（104 cell /mL） C 標(biao)準品：1mg/mL。

注意事項：

1. 試劑盒中有易(yi)揮發性物質(zhi)，實驗(yan)過程中需佩(pei)戴手(shou)套和口罩(zhao)，試劑瓶蓋(gai)打開后應該(gai)及時蓋(gai)緊。

2. 加試劑二后需劇烈(lie)震(zhen)蕩，使待測液中甘油(you)三酯得到充分提取。

3. 檢出限(xian)為(wei) 100μ mol/L。

試劑(ji)一：自(zi)備，取玻璃空瓶，加入(ru) 45mL 正庚烷，80mL 異(yi)丙醇(chun)，蓋(gai)緊后混勻(yun)，4℃保存(cun)。

劑(ji)二：液(ye)體 3mL×1 瓶(ping)，4℃保存。

試劑三：液體 10mL×1 瓶(ping)，4℃保存。

試劑四：液(ye)體(ti) 3mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑五：液體 10mL×1 瓶(ping)，4℃避光保存(cun)。

試劑(ji)六：液體(ti) 10mL×1 瓶，4℃避光(guang)保存。標準(zhun)品(pin)：液體(ti) 5mL×1 瓶，1mg/mL 甘(gan)油三酯標準(zhun)溶液，4℃保存。

相關文獻:

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