產品名稱:FDA水解酶活性檢(jian)測試劑盒
產品型號:BC0485
產品特點:FDA水解酶活性檢測試劑盒測定意義:FDA水解反應能很好的反應土壤中微生物活性和土壤質量的變化以及生態系統中有機質的轉化,是土壤質量研究中的重要生物學指標之一。測定原理:FDA是一種無色化合物,在介質中能被許多土壤酶所催化水解,并經脫水反應,產生酶解終產物熒光素,穩定不易被分解,并在490nm處有強吸收峰,通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。
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FDA水解酶活性檢測試劑盒
操作步驟:
一(yi)、 樣本處理稱(cheng)取風干(gan)過 30-50 目篩土壤(rang)約 0.1g,備(bei)用。
二(er)、 測定操作(zuo)表空(kong)白(bai)管(guan)(guan) 標(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)管(guan)(guan) 對(dui)照管(guan)(guan) 測定管(guan)(guan)樣本(g) 0.05 0.05 標(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)液(ye)(μL) 40 雙(shuang)蒸(zheng)水(shui)(μL) 40 試(shi)劑(ji)一(μL) 200 200 240 200 試(shi)劑(ji)二(er)(μL) 40 充分混(hun)勻,30℃,震(zhen)蕩 1h 試(shi)劑(ji)三(san)(mL) 160 160 160 160 10000g,25℃,離心(xin) 5min,取 200μL 上清于微量石英(ying)比(bi)色(se)皿/96 孔(kong)板中測定 490nm 處(chu)吸(xi)光(guang)值 A,△ A1=A 標(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)管(guan)(guan)-A 空(kong)白(bai)管(guan)(guan),△ A2=A 測定管(guan)(guan)-A 對(dui)照管(guan)(guan)
注意:空白管和標(biao)準管只(zhi)需(xu)測定一次。
FDA水解酶活性檢測試劑盒
標準(zhun)液:液體(ti) 4mL×1 瓶,4℃保存。
試劑(ji)一:液體 40mL×1 瓶(ping),4℃保存。
試劑二:粉(fen)劑 1 瓶,-20℃避光保(bao)存,臨用前(qian)加 4mL 試劑三溶解。
試劑三:液體 40mL×1 瓶,4℃保存(cun)。
酶活性計算公式
a. 用微量(liang)石英比色皿測定(ding)的計算公式如下(xia)
酶活性定義:每克土壤每天產生 1μmol 熒光(guang)素的(de)量為(wei)一個酶活力單位(wei)。 FDA 活性(μmol/d/g)=(△ A2÷△ A1×C 標準品)×V 反總÷W = 2.4×(△ A2÷△ A1)÷W
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
酶(mei)活(huo)(huo)(huo)性(xing)定(ding)義:每克土壤每天(tian)產生 1μmol 熒(ying)光素的(de)量為一個酶(mei)活(huo)(huo)(huo)力(li)單位。 FDA 活(huo)(huo)(huo)性(xing)(μmol/d/g)=(△ A2÷△ A1×C 標準(zhun)品(pin))×V 反總(zong)(zong)÷W = 2.4×(△ A2÷△ A1)÷W C 標準(zhun)品(pin):標準(zhun)品(pin)濃(nong)度 100μmol/L;V 反總(zong)(zong):反應(ying)總(zong)(zong)體積,0.4mL;W:樣本(ben)質(zhi)量,g
注意事項:
1. 盡(jin)量采用新鮮(xian)土(tu)樣或者短期低溫保存樣品,否則很難準確反映酶(mei)的活性。
2. 測(ce)定之前進(jin)行(xing)預實(shi)驗(yan),若吸(xi)光(guang)值較高(gao),請進(jin)行(xing)適當的(de)稀釋再(zai)測(ce)定,并在(zai)計算公式(shi)中(zhong)乘以稀釋倍數。
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