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          淀粉分支酶（SBE）測定試劑盒 微量法

測定意義(yi)：SBE（EC 2.4.1.18）主要存(cun)在于(yu)植物中，是參(can)與(yu)支鏈淀粉合成的關(guan)鍵酶，測定SBE活(huo)性(xing)在淀粉生物合成、農作(zuo)物品種選育和品質遺(yi)傳改(gai)良研(yan)究中具有重要意義(yi)

測定原(yuan)理：淀粉和碘結(jie)合后在660nm有(you)特征光吸(xi)(xi)收，SBE可切斷支(zhi)鏈淀粉側支(zhi)，從而降低了淀粉-碘復合物在660nm吸(xi)(xi)收值，一定時間內吸(xi)(xi)光度下降的百分率(lv)可以(yi)反映SBE活性(xing)。

需要(yao)的儀器，耗(hao)材(cai):可(ke)見分光(guang)光(guang)度計/酶標(biao)儀、水浴鍋(guo)、臺式離心機、可(ke)調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾(liu)水。

 淀粉分支酶（SBE）測定試劑盒 微量法

一、粗酶液提(ti)取按照(zhao)組(zu)織質量（g）：提(ti)取液體積(ji)(mL)為 1：5~10 的比例（建議(yi)稱取約 0.1g 組(zu)織，加入(ru) 1mL 提(ti)取液），進行冰(bing)浴(yu)勻(yun)漿(jiang)。15000g 4℃離心(xin) 10min，取上清，置(zhi)冰(bing)上待(dai)測(ce)(ce)。二、測(ce)(ce)定步驟試劑名稱（μL） 對照(zhao)管(guan) 測(ce)(ce)定管(guan) 95℃水浴(yu) 1min 后滅活的粗酶液 250 粗酶液 250 試劑一 320 320 試劑二 30 30 混勻(yun)，37℃準確保溫(wen) 20 min，95℃水浴(yu) 1 min（蓋(gai)緊防(fang)止水分散失），冷(leng)卻試劑三 500 500 試劑四 40 40 混勻(yun)，室溫(wen)靜置(zhi) 10min，用蒸餾(liu)水調零，660nm 處(chu)讀取各管(guan)吸(xi)光值。，注意： 1、 可以在不(bu)同對照(zhao)管(guan)中加入(ru)不(bu)同樣品的粗酶液，然(ran)后集中進行 1min95℃水浴(yu)處(chu)理。 2、 試劑一如有沉淀，加入(ru)之前要使(shi)之充分溶解(jie)混勻(yun)。

1、按照蛋(dan)白(bai)濃度(du)計算單位的定義：以波(bo)長 660nm 的吸(xi)光度(du)下降百分率表(biao)示(shi)(shi)，每(mei) mg 蛋(dan)白(bai)在反應(ying)體系(xi)中(zhong)每(mei)降低(di) 1％碘(dian)(dian)藍(lan)值(zhi)(zhi)為(wei)一個(ge)酶(mei)(mei)活性單位。 SBE 活性(U/mg prot)=( A 對(dui)照管(guan)-A 測(ce)定管(guan))/A 對(dui)照管(guan)÷Cpr ×100 2、按照樣本鮮(xian)重(zhong)計算單位的定義：以波(bo)長 660nm 的吸(xi)光度(du)下降百分率表(biao)示(shi)(shi)，每(mei) g 組(zu)織在反應(ying)體系(xi)中(zhong)每(mei)降低(di) 1％碘(dian)(dian)藍(lan)值(zhi)(zhi)為(wei)一個(ge)酶(mei)(mei)活性單位。 SBE 活性(U/g 鮮(xian)重(zhong))=(A 對(dui)照管(guan)-A 測(ce)定管(guan))/A 對(dui)照管(guan)÷(W÷V 樣總)×100 V 樣總：提(ti)取(qu)液總體積，1mL；Cpr：樣本蛋(dan)白(bai)質濃度(du)，mg/mL；W：樣品質量，g；T：反應(ying)時間，5min。

相關文獻：

《ARSENATE INDUCED CHLOROSIS 1/ TRANSLOCON AT THE OUTER ENVOLOPE MEMBRANE OF CHLOROPLASTS 132 Protects Chloroplasts from Arsenic Toxicity 》 作者:Peitong Wang, Xi Chen, Xuan Xu, Chenni Lu, Wei Zhang, Fang-Jie Zhao 期刊:Plant physiology 影響因子:6.305 PMID: