產品名稱:游離膽固醇(FC)含量(liang)測定試劑盒 微量(liang)法
產品型號:BC1895
產品特點:游離膽固醇(FC)含量測定試劑盒 微量法品牌:Solarbio | 貨號:BC1895 檢測方法 : 微量法規格:100管/96樣
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游離膽固醇(FC)含量測定試劑盒 微量法
測定意義:FC是構成細胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。
測定原理: FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。
自備儀器和用品:水浴鍋、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
游離膽固醇(FC)含量測定試劑盒 微量法
分光光度法
注(zhu)意:正式測定(ding)之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定(ding)。
貨號:BC1895
規格:100管/96樣
產品內容:
試劑一:異(yi)丙醇50mL(自(zi)備(bei));
工作(zuo)液(ye):液(ye)體50mL×1瓶,4℃保存(cun);
標準品(pin):液(ye)體(ti)1mL×1支,濃度為5μmol/mL,4℃保存。
產品說明: FC是構(gou)成細胞膜(mo)的主要成分,也是合成腎上(shang)腺皮質(zhi)激素、性(xing)激素、膽汁酸及維生素D等(deng)生理活 性(xing)物質(zhi)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。
測定原(yuan)理(li): FC氧化(hua)酶(mei)催化(hua)FC生(sheng)成(cheng)(cheng)△4-膽甾(zai)烯(xi) 酮和H2O2,過氧化(hua)物酶(mei)催化(hua)H2O2、4-氨基(ji)安替比(bi)林和酚生(sheng)成(cheng)(cheng)紅(hong)色醌(kun)類化(hua)合(he)物,在500nm有(you)吸收峰, 其顏色深淺(qian)與(yu)FC含(han)量成(cheng)(cheng)正比(bi)。 自備(bei)儀(yi)器和用品: 水(shui)浴鍋、可調(diao)式移液(ye)槍、可見分光光度計、石(shi)英(ying)比(bi)色皿、異丙醇和蒸餾(liu)水(shui)。
操作步驟:
一、FC的提取:
1. 組(zu)織:按照組(zu)織質量(g):試劑一(yi)體積(mL)為(wei)1:5~10的比例(建議稱(cheng)取(qu)約0.1g組(zu)織,加入1mL 試劑一(yi))進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取(qu)上清置冰上待測。
2. 細(xi)菌、真菌:按照細(xi)胞數(shu)量(104個(ge)):試劑(ji)一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xi) 胞加入1mL試劑(ji)一),冰(bing)浴超聲(sheng)波破碎細(xi)胞(功率300w,超聲(sheng)2秒,間隔3秒,總時間3min); 然(ran)后8000g,4℃,離(li)心10min,取上清置于冰(bing)上待測。
3. 血清(qing)(漿)樣品:直接測(ce)定。
二、測定操作:
1. 分光光度計預熱 30min,調節波(bo)長到 500nm,蒸餾水調零(ling)。
2. FC 工作液在 40℃水浴中預熱 30min。
3. 標準(zhun)管:依次在(zai) 1ml 玻璃比色皿中加入 20μLFC 標準(zhun)液(ye)(ye)和 980μLFC 工作液(ye)(ye),5min 后于 500nm 測定 A 標準(zhun)管。 標準(zhun)管只(zhi)需做 1-2 個。
4. 測定(ding)管:依次在 1ml 玻璃比色皿中加入(ru) 20μLFC 測定(ding)液和(he) 980μLFC 工作液,5min 后于 500nm 測定(ding) A 標準管。
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