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鈣熒光探針 Fluo 3-AM 細胞檢測

鈣熒光探針 Fluo 3-AM 細胞檢測產品說明

Ø Fluo-3 AM 是常用的(de)檢測細胞(bao)內(nei)鈣離子(zi)濃(nong)度的(de)熒(ying)光(guang)探針(zhen)之一。分子(zi)式為 C₅₁H ₅₀Cl ₂N ₂O ₂₃，分子量為

1129.85。

Ø Fluo-3 和 Fura-2 相(xiang)比，其優點是：一方面可(ke)以被氬離子激光(argon-ion laser) 的 488nm 激發光激發，便于檢測(ce)；另一方面(mian)，Fluo-3 和鈣(gai)離子結合(he)后熒光變(bian)化(hua)(hua)更強，即(ji)對鈣(gai)離子濃度變(bian)化(hua)(hua)的(de)檢測更加靈敏；同時，Fluo-3 和(he)鈣離子(zi)的結(jie)合能力較(jiao)弱，這樣可以比 Fura-2 檢測到細胞內更高濃度的(de)鈣離(li)子水平；此外，對于細胞內的(de)鈣離(li)子的(de)即時變化反應得更加準確，減小(xiao)了因為和(he)鈣(gai)離(li)子解離(li)速度慢而導致的(de)熒光變化滯后。

Ø 本 Fluo-3 AM (鈣(gai)離子熒光探針) 是配制于無水(shui)DMSO (anhydrous DMSO)中的儲存液，濃度為 5mM。

Ø Fluo-3 AM 是(shi)一種(zhong)可以穿透(tou)細(xi)胞膜(mo)的熒光染料。Fluo-3 AM 的熒光(guang)非常弱，其熒光(guang)不(bu)會隨鈣離子濃度升高而增強。

Fluo-3 AM 進入細胞(bao)后可以被細胞(bao)內的酯酶剪(jian)切(qie)形(xing)成 Fluo-3，從(cong)而被(bei)滯(zhi)留在細胞內(nei)。Fluo-3 可(ke)以和鈣離子(zi)結合(he)，結合(he)鈣離子(zi)后(hou)可以(yi)產生較(jiao)強的(de)熒光(guang)，大激發波長為 506nm，大發(fa)射波長為 526nm。實際檢測時(shi)推薦使用(yong)的激(ji)發波長為 488nm 左右，發射波長(chang)為 525-530nm。

用于細胞內鈣離子檢測(ce)時，Fluo-3 AM 的常用(yong)濃(nong)度(du)為 0.5-5μM 。通常(chang)用(yong)含有 0.5-5μM 的 Fluo-3 AM 的適當溶液和細胞一起在 20-37℃孵(fu)育 15-60 分鐘進行熒光(guang)探針裝載，隨后適(shi)當(dang)洗(xi)滌，洗(xi)滌后可以考慮適(shi)當(dang)再(zai)孵(fu)育20-30 分鐘以確(que)保Fluo-3 AM 在(zai)細胞內*轉變成 Fluo-3。

Ø 本 Fluo-3 AM 在 4℃、冰浴等較低溫度(du)情況下會凝固而粘在離(li)心管管底(di)、管壁或管蓋內，可以(yi) 20-25℃水浴溫(wen)育片(pian)刻全部融解(jie)后(hou)使用(yong)。

Ø 熒光染料均存在淬(cui)滅問(wen)題(ti)，請(qing)盡量注意避光，以減緩熒光淬(cui)滅。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手(shou)套操作