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Hoechst 33258 熒光染料

別名：2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)- 2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride;2-[2- (4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6-(1-methyl-4- piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258； Hoechst 33258

說明：熒光色素；用于DNA、染色體和核酸的染色；熒光染色法和免疫熒光技術。Hoechst 33258 是(shi)一種可以穿(chuan)透細胞膜的藍色熒光(guang)染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后(hou)釋放強(qiang)烈的藍色熒光，對細(xi)胞的毒性(xing)較低。Hoechst 33258 常(chang)用于(yu)細胞凋(diao)亡檢測(ce)，染色(se)后(hou)用熒(ying)光顯微鏡觀(guan)察(cha)或(huo)流式細胞儀檢測(ce)，也可以用于(yu)普通的細胞核染色(se)，或(huo)常(chang)規的DNA染色。

物理性狀：黃(huang)色(se)深黃(huang)色(se)粉末；溶于(yu)水(shui)，黃(huang)或棕色(se)溶液，參考濃度為9.80 - 10.20 mg/ml；熔點＞300℃。

用途：細(xi)胞遺傳學研究的常用(yong)試劑，熒(ying)光染色細(xi)胞的DNA ，插入DNA的A-T區，具有低的細(xi)胞毒性，形(xing)成膜滲透(tou)性熒(ying)光DNA鏈。

用于細胞核染色時，推薦的(de)Hoechst 33258工作濃度為0.5-10μg/ml。

配制母液

Hoechst 33258溶于水，溶解(jie)度可達10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的(de)母液于4℃避光保存。

注意事項

1) Hoechst 33258 對人(ren)體有一(yi)定刺激性，請注意適當防護。

2) 熒光(guang)染(ran)料都(dou)存在淬滅的(de)問題，建議染(ran)色后盡量當天完成檢(jian)測。

3) 為減緩(huan)熒光(guang)(guang)淬(cui)滅可以使用抗熒光(guang)(guang)淬(cui)滅封片液(ye)。

4) 為了您的安全和健康，請穿實(shi)驗服并(bing)戴一次性手套操作。

使用方法

1.   用PBS或合適(shi)的(de)緩沖液制(zhi)備(bei)10～50µM Hoechst 33258染色(se)液。

2.   固定的細(xi)胞或組織染(ran)色：

對于固定的細胞(bao)或(huo)組(zu)織(zhi)樣(yang)品(pin)，固定后，適當洗(xi)滌去除固定劑。隨后如果(guo)需(xu)要(yao)進行(xing)免(mian)疫熒光(guang)(guang)染(ran)色(se)(se)，則行(xing)免(mian)疫熒光(guang)(guang)染(ran)色(se)(se)，染(ran)色(se)(se)完畢后再按(an)后續步驟(zou)進行(xing)Hoechst33258染(ran)色(se)(se)。如果(guo)不需(xu)要(yao)進行(xing)其(qi)它染(ran)色(se)(se)，則直接進行(xing)后續的Hoechst 33258染(ran)色(se)(se)。

a) 對(dui)于貼壁細胞或組(zu)織(zhi)切片：加入(ru)適量Hoechst 33258染色液(ye)，覆蓋住樣(yang)(yang)品即可。對(dui)于懸(xuan)浮(fu)細胞：少加入(ru)待測染色樣(yang)(yang)品體積(ji)3倍的染色液(ye)，混勻(yun)。室(shi)溫(wen)放置3-5分鐘。

b)  吸(xi)除Hoechst 33258染色液，用(yong)TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

c) 直接(jie)在熒光(guang)顯微(wei)鏡下觀察(cha)(cha)或封片后熒光(guang)顯微(wei)鏡下觀察(cha)(cha)。激(ji)發波長(chang)(chang)350nm，發射波長(chang)(chang)460nm。

3.  活(huo)細胞或組織染色：

a) 細胞(bao)培養(yang)物中加入適量Hoechst 33258染(ran)色(se)液，約1/10細胞(bao)培養(yang)基體積，必須充分覆蓋住待(dai)染(ran)色(se)的(de)樣品。通常對于六孔(kong)板一(yi)個孔(kong)需加入1ml染(ran)色(se)液，對于96孔(kong)板一(yi)個孔(kong)需加入100μl染(ran)色(se)液。

b) 在 37℃培養細胞 10～20 分(fen)鐘。

c) 用(yong) PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

d) 直接在熒(ying)(ying)光顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察或封(feng)片后熒(ying)(ying)光顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察。激(ji)發波(bo)長350nm，發射波(bo)長460nm。

相關文獻：

《Dioscin-6′-O-acetate inhibits lung cancer cell proliferation via inducing cell cycle arrest and caspase-dependent apoptosis》 作者:XuejiaoLiaZhuoQubSongsongJingcXiaLiaChengchengZhaoaShuliMandYingWangeWenyuanGaoac 期刊:Phytomedicine 影響因子:3.61 PMID:30668391
《Protective effect of 17β-estradiol on hydrogen peroxide induced apoptosis of rat nucleus pulposus cells》 作者:Sheng-Hua Ning, Si-Dong Yang, Xu Zhang, Huan-Liu, Hai-Kun Wei, Hai-Ying Wang, Da-Long Yang, Wen-Yuan Ding 期刊:CLINICAL 影響因子:0.848 PMID:
《Protein kinase Cα inhibits myocardin-induced cardiomyocyte hypertrophy through the promotion of myocardin phosphorylation》 作者:Weizong Li,  Nan Wang,  Man Li,  Huiqin Gong,  Xinghua Liao, Xiaolong Yang , Tongcun Zhang 期刊:Acta Biochimica et Biophysica Sinica 影響因子:1.807 PMID:26206583
《Ethyl Pyruvate Attenuates CaCl2-Induced Tubular Epithelial Cell Injury by Inhibiting Autophagy and Inflammatory Responses》 作者:Zhao J， Cheng J， Li C， Xu M，Ma C， Qin L， Yi K， Liao N 期刊:kidney blood pressure research 影響因子:2.123 PMID:30352436
 

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