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產品名稱:土壤中(zhong)性蛋白(bai)酶活性檢(jian)測試劑盒 微量法(fa)

產品型號:BC0275

產品報價:

產品特點:土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法
測定意義:土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性環境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。

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BC0275土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法的詳細資料:

土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法

土壤(rang)中性(xing)蛋白酶活性(xing)檢測(ce)試劑(ji)盒說明書
微量法

產地:北京(jing)市通州區馬駒(ju)橋聯東U谷(gu)8三樓
英文名稱:Soil neutral protease activity detection kit
產品商標:solarbio

注意:正式測定之前選擇(ze)2-3 個預期(qi)差異(yi)大的(de)樣本做預測定。
貨號(hao):BC0275
規格(ge):100T/48S
保存與(yu)運輸:4℃保存(cun)或-20℃保存(cun);            
參考價格:1380
庫(ku)存(cun)狀態(tai):現(xian)貨
關鍵詞:土壤中性蛋白酶|土壤中性蛋白酶活性檢測|蛋白酶活性檢測
產品(pin)內容
試(shi)劑一:液(ye)體20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二(er):粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用(yong)前(qian)加(jia)入10mL試劑一,沸水浴攪拌(ban)溶解后待用(yong);
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保(bao)存;臨用(yong)(yong)前加入10mL 蒸餾水(shui)充分溶解待用(yong)(yong);
試劑四:液體20mL×1 瓶,4℃保存(cun);
試劑五:液體5mL×1 瓶,4℃保(bao)存;
標準品(pin):液體1mL×1 支,0.2 μmol/mL 酪氨(an)酸(suan)溶液,4℃保存。

產品說明:
土壤(rang)蛋(dan)(dan)白酶參與(yu)土壤(rang)中(zhong)存在(zai)的氨基酸(suan)、蛋(dan)(dan)白質以(yi)及其他(ta)含蛋(dan)(dan)白質氮(dan)的有機(ji)化合物的轉(zhuan)化,其水(shui)解產(chan)(chan)物是高等(deng)植物的氮(dan)源之一。土壤(rang)中(zhong)性(xing)蛋(dan)(dan)白酶在(zai)中(zhong)性(xing)環境下(xia)催(cui)化蛋(dan)(dan)白質水(shui)解,與(yu)土壤(rang)有機(ji)質含量(liang)、氮(dan)素(su)及其他(ta)土壤(rang)性(xing)質有關。中(zhong)性(xing)條(tiao)件下(xia),土壤(rang)中(zhong)性(xing)蛋(dan)(dan)白酶可將酪(lao)蛋(dan)(dan)白水(shui)解產(chan)(chan)生酪(lao)氨酸(suan);在(zai)堿性(xing)條(tiao)件下(xia),酪(lao)氨酸(suan)還原磷鉬(mu)酸(suan)化合物生成鎢藍,在(zai)680nm 有特征吸收峰。

實驗中所需儀器及設備:
可見分光光度計/酶標儀、水(shui)浴(yu)鍋、可調式移液槍、微量比色皿(min)/96孔板、甲苯、蒸餾(liu)水(shui)、50目篩(或更(geng)小)。

樣品處理:
新鮮土樣自然風(feng)干或37℃烘箱風干,過30~50 目篩。

操作步驟:
1、分光(guang)光(guang)度計/酶標儀預熱(re)30min 以上,調(diao)節波(bo)長(chang)680nm,蒸餾水(shui)調(diao)零。
2、樣本(ben)測定:
試劑(ji)名稱         測定管(guan)               對照管(guan)         標準管(guan)              空白管(guan)
風干土樣(g)      0.05                 0.05            -                   -
試劑一(μL)       50                   50             -                   -
試(shi)劑二(er)(μL)       100                                 -                   -
        ;          混勻(yun)后,37℃反應24h,期(qi)間振(zhen)蕩(dang)5-6 次,使土樣與反應液(ye)充分接觸。
試劑三(μL)       100                  100            -                   -
試劑二(μL)        -                   100            -                   -
                           混勻(yun),10000rpm 室溫離心10min,取(qu)上(shang)清(qing)液
上(shang)清(qing)液(μL)         44                   44            -                   -
標(biao)準液(μL)         -                    -            ; 44                  -
蒸餾(liu)水(μL)         -                    -             -                  44
試劑四(μL)        130                  130            130               130
試(shi)劑五(μL)         26                   26             26                26

混勻,40℃水浴(yu)10min,10000rpm 室溫(wen)離心10min,取上清(qing)液于680nm 下讀取各管吸光(guang)值A,分(fen)別記為A 測(ce)定(ding)管、A 對照管、A 標(biao)準(zhun)(zhun)管、A 空白(bai)管,計(ji)算ΔA 測(ce)定(ding)=A 測(ce)定(ding)管-A 對照管,ΔA 標(biao)準(zhun)(zhun)=A 標(biao)準(zhun)(zhun)管-A 空白(bai)管。

注意(yi):標準管(guan)(guan)、空白管(guan)(guan)只需測(ce)一次。每個測(ce)定(ding)管(guan)(guan)設一個對照管(guan)(guan)。

土(tu)壤中(zhong)性蛋(dan)白(bai)酶活性計算(suan):
單位定義:每天每g土(tu)樣(yang)中產生1μmol 酪氨酸為一個土(tu)壤中性蛋白酶活(huo)力(li)單位。土(tu)壤中性蛋白酶(U/g)=C標(biao)準(zhun)×ΔA測(ce)(ce)定(ding)÷ΔA標(biao)準(zhun)×V 反總÷W÷T= 0.05×ΔA測(ce)(ce)定(ding)÷ΔA標(biao)準(zhun)÷W。
C 標準管(guan):標準管(guan)濃度,0.2 μmol/mL;
V 反總:反應(ying)體(ti)系總體(ti)積,0.25mL;
T:反(fan)應時間,1d;
W:樣本(ben)質量,g。

注意事項:
1、當吸(xi)光值大于1.5時(shi),建議將上清(qing)液稀釋后進行測定,計算時(shi)注意乘以稀釋倍(bei)數。
 

相關文獻: 

《Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi》 作者:Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, Ying Teng,Zhihong Xu 期刊:Environmental Science and Pollution Research 影響因子:2.914 PMID:29860689

土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法

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