脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒

產品名稱:脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒

產品英文名(ming): Proline (PRO) Content Assay Kit

產(chan)品貨號：BC0290           產地：北(bei)京市(shi)通州區馬駒橋聯東U谷8三(san)樓

產品規格(ge)：50管/48樣(yang)        產品商標(biao)：solarbio
保(bao)存與運輸：4℃保(bao)存或-20℃保(bao)存；            參考(kao)價(jia)格：720
庫存狀態(tai)：現貨                          
關鍵字: ：  脯氨酸(suan)檢測試劑盒|PRO檢(jian)測試劑(ji)盒|脯氨酸(suan)|試劑盒

簡(jian)要介紹：
Pro 廣泛存在(zai)于動物(wu)、植(zhi)物(wu)、微生物(wu)和培養細胞(bao)中，逆(ni)境條(tiao)件下，植(zhi)物(wu)體(ti)內Pro 含(han)量顯著增(zeng)(zeng)加。Pro 增(zeng)(zeng)加量在(zai)一(yi)定程度上反映了抗(kang)逆(ni)性，抗(kang)旱性強的(de)品(pin)種往往積累較多的(de)脯氨(an)酸。因(yin)此(ci)，脯氨(an)酸增(zeng)(zeng)加量可以作為抗(kang)逆(ni)育種的(de)生理指標(biao)之一(yi)。
    用磺(huang)基水楊酸（SA）提取Pro，加(jia)熱處理后，Pro 與酸性茚三酮溶液反應生成紅色；加(jia)甲(jia)苯萃取后，在520nm 測定吸光度(du)。

產品詳細描述
產品(pin)內(nei)容：
提取液：液體(ti)50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：冰乙酸4℃保(bao)存(cun)。（自備）
試劑二：液(ye)體45 mL×1瓶(ping)， 4℃保存。
試劑(ji)三：甲(jia)苯4℃保存。（自(zi)備）
標準品：脯氨酸 10mg，4℃保存。

產品(pin)說(shuo)明：
脯(fu)氨酸(Pro)廣泛存(cun)在于動物、植(zhi)物、微生物和培(pei)養細(xi)胞中，逆境條件(jian)下，植(zhi)物體(ti)內Pro含量顯著增加。Pro增(zeng)加量(liang)在一定(ding)程度上(shang)反映了(le)抗逆性，抗旱性強的(de)品種往(wang)往(wang)積(ji)累較(jiao)多的(de)脯氨酸。因此，脯氨酸增(zeng)加量(liang)可以(yi)作為(wei)抗逆育(yu)種的(de)生(sheng)理指(zhi)標(biao)之一。 
用磺基水(shui)楊(yang)酸（SA）提取(qu)Pro，加(jia)熱處理后，Pro與酸性茚三酮溶液反應生(sheng)成(cheng)紅(hong)色；加甲(jia)苯(ben)萃取(qu)后，在520nm測定(ding)吸光度(du)。
實(shi)驗需自備的(de)儀器和(he)用品(pin)：
 可見分光(guang)光(guang)度計(ji)、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻(bo)璃比色(se)皿、冰乙酸、甲苯、研缽、冰和蒸(zheng)餾水。

操(cao)作步驟(zou)：
一、樣(yang)品測(ce)定的準備 
1、細胞(bao)、細菌或組織樣品的制備 ： 
細(xi)菌(jun)或細(xi)胞：先收集細(xi)菌(jun)或細(xi)胞到離心管內(nei)，棄上清；按照每100萬(wan)細菌或(huo)細胞加入1mL提(ti)取液(ye)，超聲波(bo)破碎細菌或細胞(bao)（功率20％，超(chao)聲3秒，間(jian)隔10秒，重復30次(ci)），之(zhi)后(hou)置沸水(shui)浴振蕩提取10min；10000g，常溫離心(xin)10min，取上(shang)清，冷卻后待測。
組織：稱取約0.1g組(zu)織，加入1mL提(ti)(ti)取液(ye)進行冰浴勻漿；之后置沸水(shui)浴振蕩提(ti)(ti)取10min，10000g，常溫(wen)離心10min，取上清，冷卻后待(dai)測。
2、血清（漿）樣(yang)品：取(qu)100μL血清（漿(jiang)）加入0.9mL提取(qu)液，充分混勻，之(zhi)后(hou)置沸水(shui)浴(yu)振蕩提取(qu)10min，10000g，常溫離(li)心10min，取上清，冷卻后待測(ce)。
3、標準品的處理：稱取1mg，將(jiang)標準品(pin)稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/mL。
 

• 測定步驟

1、分(fen)光光度計預(yu)熱30min以上，調節波長(chang)520nm，甲苯調零。
2、取0.5mL上清(qing)液(ye)（或稀(xi)釋后的標準品）+0.5mL試劑一+0.5mL試劑(ji)二(er)于有蓋試管中(zhong)，置沸水浴中(zhong)保溫(wen)30min（蓋緊，防止水分散失(shi)），每(mei)10min振(zhen)蕩一次。
3、待冷卻(que)后，在試(shi)管中加入1mL試劑(ji)三，振蕩(dang)30s，靜置片(pian)刻，使色素轉試劑(ji)三中；吸(xi)取0.8mL-1mL上層溶(rong)液于1mL玻(bo)璃比色皿(min)中，于520nm波(bo)長處比色(se)，記錄吸(xi)光值。
4、根(gen)據標準(zhun)品吸光值和濃度，建立標準(zhun)曲線。

三、Pro含(han)量(liang)計算(suan)：
1、通過(guo)標準曲線計算樣品脯(fu)氨酸(suan)含量(y為脯氨酸含量，μg/mL；x為(wei)OD值(zhi))
2、按照細菌(jun)、細胞個數或者組織鮮(xian)重計算，先(xian)根(gen)據標準(zhun)曲線求得y值：
細胞或(huo)細菌中脯氨(an)酸含(han)量(μg/10⁴ cell)= y÷細胞濃度(du)(10⁴ cell/mL)
Pro含量(liang)(μg/g mass) =y÷樣本鮮重(g/mL)
3、血清（漿）中脯氨酸含量，先(xian)根(gen)據標(biao)準曲線求得y值：
Pro含量[μg/mL血清（漿）] = y÷0.1mL血清（漿）/mL
注意(yi)：提取(qu)液(ye)中含有蛋(dan)白(bai)沉淀劑，提取(qu)的(de)上清液(ye)不能用于蛋(dan)白(bai)濃(nong)度的(de)測定。
 

相關文獻：

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