產品名稱:人外周血淋巴(ba)細胞分離液(ye)
產品型號:P8610
產品特點:人外周血淋巴細胞分離液品牌:Solarbio | 貨號:P8610 | 英文名稱 : Lymphocyte Separation Medium (Human) 儲存條件 : 15?25℃避光保存 單位 : 瓶
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外周血(xue)中單個核細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)包括淋(lin)(lin)巴細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)單核細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)等(deng)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),其(qi)體積(ji)、形態和(he)密度(du)與其(qi)他細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)不(bu)同(tong),紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)粒細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度(du)較大,為1.090 g/ml 左右(you),而(er)淋(lin)(lin)巴細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和(he)單核細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)密度(du)為1.075~1.090 g/ml,血(xue)小板為1.030~1.035 g/ml。為此,將葡聚糖(右(you)旋糖酐(gan))和(he)泛影酸葡甲胺按(an)一(yi)(yi)定(ding)比例混合,調(diao)整比重(zhong)、pH 值和(he)滲透壓,經過(guo)澄清(qing)及過(guo)濾除菌后制成一(yi)(yi)種密度(du)在1.077g/ml 并且(qie)近于等(deng)滲的溶液(ye)(分層(ceng)液(ye)),經過(guo)密度(du)梯度(du)離心使一(yi)(yi)定(ding)密度(du)的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)按(an)相應(ying)密度(du)梯度(du)分布,從而(er)將各種血(xue)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)加以分離。
本(ben)品為帶(dai)有乳(ru)光(guang)或微乳(ru)光(guang)的注射(she)水溶液,主要組(zu)成成份是葡聚糖(右(you)旋(xuan)糖酐)與泛影酸葡甲胺。適用于從人抗凝血液中分離單個核細胞(bao)(主要為淋巴細胞(bao)),無菌(jun)條件(jian)下所分離的細胞(bao)可用于免疫學檢測。
分離方法(fa)說明及圖例:
取(qu)新鮮抗凝血1ml,與生(sheng)理(li)鹽水(shui)1:1 混勻后,小心加于2ml細(xi)(xi)胞(bao)(bao)分(fen)離(li)液之(zhi)液面上;以400g(約1500轉/分(fen),半徑(jing)15cm水(shui)平(ping)轉子)離(li)心20分(fen)鐘(zhong),此(ci)時離(li)心管(guan)中由上下細(xi)(xi)胞(bao)(bao)分(fen)四層(ceng)(ceng)。*層(ceng)(ceng):為(wei)血漿層(ceng)(ceng)。第二層(ceng)(ceng):為(wei)環狀乳白色(se)淋(lin)巴細(xi)(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)。第三層(ceng)(ceng):為(wei)透(tou)明分(fen)離(li)液層(ceng)(ceng)。第四層(ceng)(ceng):為(wei)紅細(xi)(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)(ceng)。收集第二層(ceng)(ceng)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)放入含(han)生(sheng)理(li)鹽水(shui)4-5ml的試(shi)管(guan)中,充分(fen)混勻后,以400g(約1500轉/分(fen))離(li)心20分(fen)鐘(zhong)。沉淀經2次洗滌后即得所需淋(lin)巴細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。
注: 提取率(lv)約為80%。
注意事項:
A.本分離液要求血液為新鮮抗凝血,避免(mian)冷凍和冷藏;在收集血液和分離過程(cheng)中,應注意無菌操作(zuo),避免(mian)微生物污染。
B.本(ben)實驗(yan)要求(qiu),在正常大(da)氣壓下,分(fen)離(li)液、分(fen)離(li)樣本(ben)以及分(fen)離(li)環境溫(wen)(wen)度(du)(du)為20℃±2℃。分(fen)離(li)液在低溫(wen)(wen)時呈(cheng)較(jiao)高(gao)密度(du)(du),在高(gao)溫(wen)(wen)時呈(cheng)較(jiao)低密度(du)(du)。細胞分(fen)離(li)液從冰箱(xiang)取(qu)出后,不(bu)可立即(ji)使用,操(cao)作前可將樣本(ben)和分(fen)離(li)液置(zhi)于20℃水浴中復溫(wen)(wen)20分(fen)鐘以保證分(fen)離(li)溫(wen)(wen)度(du)(du)。
C.由于各(ge)品(pin)牌離(li)(li)心機的性能(neng)不(bu)同(tong),國(guo)內南(nan)北地(di)區溫(wen)度環(huan)境和(he)四季的差異,可能(neng)影響分(fen)離(li)(li)效果,用戶可以調節(jie)離(li)(li)心轉數(shu)和(he)離(li)(li)心時間(jian),摸索(suo)佳的分(fen)離(li)(li)條(tiao)件(具(ju)體(ti)分(fen)離(li)(li)條(tiao)件各(ge)實驗室自定)。
D.好使用無靜電反(fan)應(ying)的離心(xin)管(guan),推薦使用未經過堿處理的玻璃離心(xin)管(guan)。
E.優(you)抗凝劑選(xuan)擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。應(ying)注意(yi)在血液稀(xi)釋過(guo)程中應(ying)去(qu)除抗凝劑體(ti)積。
產品性能指標:
密度 1.077±0.001g/ml
pH 7.0-7.5
滲(shen)透壓 280-340mOsmol/kg
內毒素 ≤0.5EU/ml
無菌 直接接種培養14天后培養基澄清
澄(cheng)明度及(ji)不溶(rong)性顆粒(li)物 每50ml 溶(rong)液中含10μm 以(yi)上的(de)不溶(rong)性微(wei)粒(li)20 粒(li)以(yi)下,
含(han)25μm 以(yi)上(shang)的(de)不溶(rong)性微粒(li)5 粒(li)以(yi)下(xia)
貯藏及保存期限:
本(ben)(ben)分離液是(shi)敏光型的,應在(zai)18℃-25℃避(bi)光保存(cun),有(you)效期(qi)兩年。啟封后置(zhi)4℃保存(cun),若保證無微生物污(wu)染, 4℃可長期(qi)保存(cun)。保存(cun)溫度較低(di)(10℃以下)時本(ben)(ben)分離液易出現白(bai)色結(jie)晶,影響(xiang)分離效果。
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