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人外周血淋巴細胞分離液

外周血(xue)中單(dan)個核細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)包括淋巴細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)(he)單(dan)核細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)等(deng)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)，其(qi)體積、形態和(he)(he)密(mi)度(du)(du)與其(qi)他細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)不(bu)同，紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)(he)粒(li)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)密(mi)度(du)(du)較(jiao)大，為1.090 g/ml 左右，而淋巴細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)(he)單(dan)核細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)密(mi)度(du)(du)為1.075～1.090 g/ml，血(xue)小板為1.030～1.035 g/ml。為此(ci)，將葡(pu)聚糖(右旋糖酐(gan))和(he)(he)泛影酸葡(pu)甲胺按一(yi)(yi)定比例(li)混合，調整比重、pH 值和(he)(he)滲透壓(ya)，經過澄清及過濾除(chu)菌后制成(cheng)一(yi)(yi)種密(mi)度(du)(du)在1.077g/ml 并且近于等(deng)滲的溶(rong)液（分(fen)(fen)層液），經過密(mi)度(du)(du)梯(ti)度(du)(du)離心使一(yi)(yi)定密(mi)度(du)(du)的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)按相應密(mi)度(du)(du)梯(ti)度(du)(du)分(fen)(fen)布，從而將各種血(xue)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)加以分(fen)(fen)離。

人外周血淋巴細胞分離液

本品為帶有乳(ru)光(guang)或微乳(ru)光(guang)的(de)注射水(shui)溶液，主要組成成份是葡聚糖（右(you)旋(xuan)糖酐(gan)）與(yu)泛(fan)影酸葡甲(jia)胺。適用于(yu)從人(ren)抗凝(ning)血液中分(fen)離單個核細(xi)胞(bao)(bao)（主要為淋巴細(xi)胞(bao)(bao)），無菌條件(jian)下(xia)所分(fen)離的(de)細(xi)胞(bao)(bao)可用于(yu)免疫(yi)學檢測。

分離(li)方法說明及圖例：

取新鮮抗凝血(xue)1ml，與生(sheng)理(li)鹽(yan)(yan)水(shui)(shui)1:1 混勻后(hou)，小心(xin)(xin)(xin)加于2ml細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)分(fen)(fen)離液之液面上(shang)；以(yi)400g（約1500轉/分(fen)(fen)，半徑(jing)15cm水(shui)(shui)平轉子）離心(xin)(xin)(xin)20分(fen)(fen)鐘，此時離心(xin)(xin)(xin)管中由上(shang)下細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)分(fen)(fen)四(si)層(ceng)。*層(ceng)：為血(xue)漿層(ceng)。第(di)二層(ceng)：為環狀乳白色淋巴細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng)。第(di)三層(ceng)：為透明(ming)分(fen)(fen)離液層(ceng)。第(di)四(si)層(ceng)：為紅細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng)。收(shou)集第(di)二層(ceng)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)放(fang)入含生(sheng)理(li)鹽(yan)(yan)水(shui)(shui)4-5ml的試(shi)管中，充分(fen)(fen)混勻后(hou)，以(yi)400g（約1500轉/分(fen)(fen)）離心(xin)(xin)(xin)20分(fen)(fen)鐘。沉淀(dian)經2次洗(xi)滌后(hou)即得所需(xu)淋巴細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)。

注(zhu)： 提(ti)取率約為80%。

注意事項：

A．本分(fen)離(li)液要求血(xue)液為新鮮(xian)抗凝血(xue)，避(bi)(bi)免冷(leng)凍和(he)冷(leng)藏；在(zai)收集血(xue)液和(he)分(fen)離(li)過程(cheng)中，應注意(yi)無菌操(cao)作，避(bi)(bi)免微生(sheng)物污(wu)染。

B．本(ben)實驗(yan)要求，在正常大(da)氣壓(ya)下，分(fen)離液(ye)(ye)、分(fen)離樣(yang)本(ben)以及分(fen)離環境溫度(du)(du)為20℃±2℃。分(fen)離液(ye)(ye)在低溫時(shi)呈較(jiao)(jiao)高密度(du)(du)，在高溫時(shi)呈較(jiao)(jiao)低密度(du)(du)。細胞分(fen)離液(ye)(ye)從冰箱取出(chu)后(hou)，不可(ke)(ke)立即(ji)使用，操作前可(ke)(ke)將(jiang)樣(yang)本(ben)和(he)分(fen)離液(ye)(ye)置(zhi)于20℃水(shui)浴中復溫20分(fen)鐘以保證分(fen)離溫度(du)(du)。

C．由于各品(pin)牌離(li)心(xin)機的(de)性能不同，國(guo)內南北地(di)區溫度(du)環境和(he)四季的(de)差異，可能影響分離(li)效果，用戶可以調節離(li)心(xin)轉數和(he)離(li)心(xin)時(shi)間，摸索佳的(de)分離(li)條件(jian)(jian)（具體分離(li)條件(jian)(jian)各實驗室自定）。

D．好使用無靜電反(fan)應的離心(xin)管，推薦使用未經過堿處(chu)理的玻(bo)璃離心(xin)管。

E．優抗(kang)凝劑(ji)選擇：EDTA、枸櫞酸(suan)、肝素。應注意(yi)在血液稀釋過程中應去(qu)除抗(kang)凝劑(ji)體(ti)積。

產品性能指標：

密度 1.077±0.001g/ml

pH                              7.0-7.5

滲透壓                         280-340mOsmol/kg

內毒素(su)      ;                  ; ≤0.5EU/ml

無(wu)菌                           直接接種培養(yang)14天后培養(yang)基澄清

澄明度(du)及不溶(rong)性顆粒(li)物           每50ml 溶(rong)液中(zhong)含(han)10μm 以上的不溶(rong)性微粒(li)20 粒(li)以下，

含25μm 以(yi)上的不(bu)溶性微(wei)粒5 粒以(yi)下(xia)

貯藏及保存期限：

本分(fen)離液(ye)是敏光型的，應在18℃-25℃避光保(bao)存(cun)，有效期兩年。啟封后(hou)置4℃保(bao)存(cun)，若保(bao)證無微(wei)生物污染， 4℃可(ke)長期保(bao)存(cun)。保(bao)存(cun)溫度較低（10℃以下）時本分(fen)離液(ye)易出現白(bai)色(se)結晶，影響分(fen)離效果(guo)。