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Solarbio-全血基因組DNA提取試劑盒
使用前請根據使用量準備一些新的容器，將10×紅細胞裂解液用雙蒸水稀釋成1×的即用型紅細胞裂解液（可一次性稀釋完，也可以分次稀釋，一般稀釋后的紅細胞裂解液可保存半年以上）。
使用說明:
自備試劑：異丙醇，75%乙醇
處理血液量 1ml 5ml 10ml
紅細胞裂解液(1×) 5ml 25ml 50ml
白細胞裂解液 0.5ml 2.5ml 5ml
蛋白沉淀液 1ml 2.5ml 5ml
異丙醇 1ml 5ml 10ml
75%乙醇 1ml 5ml 10ml
DNA溶解液 100ul 0.5ml 1ml
1、 樣品的處理(本產品適用于處理新鮮的或已經添加抗凝劑的血液樣品)：在血液樣品中加入3倍體積的紅細胞裂解液(請確認已經稀釋過)，充分顛倒混勻，12000rpm離心1min(如為大量提取并且為大離心機，可11000轉離心5min)，小心吸去上清，再加入2倍體積的紅細胞裂解液，用移液器輕輕吹打沉淀，充分混勻，離心，棄上清，沉淀為白細胞。向沉淀中加500ul（以1ml全血為例）白細胞裂解液，振蕩*混勻(或者用移液器吹打)。
2、65℃水浴10-20min，期間可顛倒離心管混勻數次，直看不見明顯細胞為止。
3、加入1倍體積蛋白沉淀液(以1ml全血為例，加入500ul)，充分顛倒混勻，此時會出現白色沉淀，65℃水浴5min，12000rpm離心5min(或者11000轉離心10min)，小心吸取上清(沉淀可能在上層，吸取下清)，放入一干凈離心管中，如還有沉淀，可再次離心。
4、在上清中加入1倍體積（以1ml全血為例，加入1ml）的異丙醇，混勻。12000rpm離心5min(或者11000轉離心10min)，此時可看到管低有少量白色沉淀。小心吸取上清，棄掉。
5、向離心管中加入75%乙醇，12000rpm離心1min(或者11000轉離心2min)，輕輕棄去上清液，再次離心，用移液器吸取上清，請不要接觸沉淀。
6、將離心管敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘，目的是將離心管中殘余的乙醇去除，否則乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。
7、向離心管中加入100-300ul經65℃水浴預熱的DNA溶解液，室溫放置讓DNA自然溶解。如果DNA難于溶解，可室溫放置。
8、DNA電泳(yong)檢測(ce)。

Solarbio-全血基因組DNA提取試劑盒
注意事項:
1. 樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA段較小且提取量也下降。
2. 若試劑盒中的溶液出現沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。
3. DNA濃度(du)(du)及純度(du)(du)檢(jian)測(ce)：得到的(de)基(ji)因組DNA段(duan)的(de)大小(xiao)與(yu)樣品(pin)保存時(shi)間(jian)、操作過(guo)程(cheng)中的(de)剪切力等因素有(you)關(guan)。回收(shou)(shou)得到的(de)DNA段(duan)可(ke)用瓊(qiong)脂糖凝膠電(dian)泳(yong)和紫外分光光度(du)(du)計(ji)檢(jian)測(ce)濃度(du)(du)與(yu)純度(du)(du)。DNA應(ying)在OD260處有(you)顯著吸收(shou)(shou)峰， OD260值(zhi)為(wei)1相當于大約 50 μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值(zhi)應(ying)為(wei)1.7-1.9，如果(guo)洗(xi)脫(tuo)時(shi)不使用洗(xi)脫(tuo)緩沖液(ye)，而使用去(qu)離子(zi)水，比值(zhi)會偏低(di)，因為(wei)pH值(zhi)和離子(zi)存在會影響光吸收(shou)(shou)值(zhi)，但并不表(biao)示(shi)純度(du)(du)低(di)。

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