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         總膽固醇（TC）含量測定試劑盒 微量法

測定意義：血清TC是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。總膽固醇包括游離膽固醇和膽固醇酯。肝臟是TC合成和貯存的主要器官。膽固醇是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質的重要原料，也是構成細胞膜的主要成分，其血清濃度可作為脂代謝的指標。臨床上將血總膽固醇增高稱為高膽固醇血癥。

測定原理：酯酶催化膽固醇酯作用下水解成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），FC在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下，經過氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物，其顏色深淺與TC含量成正比。

總膽固醇（TC）含量測(ce)定試劑盒 微量法

注(zhu)意：正(zheng)式(shi)測(ce)定(ding)之(zhi)前選擇2-3 個預(yu)期差異大的樣本做預(yu)測(ce)定(ding)。

貨號：BC1985

規格：100 管/96 樣(yang)

產品內容：

    試劑一：異丙醇100mL（自備）。

    TC 工作液：液體20mL×1 瓶，4℃保(bao)存(cun)。

    TC 標(biao)準品：液體×1 支(zhi)，0.5μmol/mL，4℃保存。

產品說明： TC 包(bao)括游(you)(you)離(li)膽(dan)(dan)(dan)固(gu)醇(chun)(chun)和(he)(he)膽(dan)(dan)(dan)固(gu)醇(chun)(chun)酯。TC 是指組織(zhi)中所有(you)脂(zhi)蛋(dan)白所含(han)膽(dan)(dan)(dan)固(gu)醇(chun)(chun)之(zhi)總和(he)(he)。利用酯酶催 化(hua)(hua)膽(dan)(dan)(dan)固(gu)醇(chun)(chun)酯水解生(sheng)成游(you)(you)離(li)膽(dan)(dan)(dan)固(gu)醇(chun)(chun)（FC）和(he)(he)游(you)(you)離(li)脂(zhi)肪酸（FFA），從(cong)而把膽(dan)(dan)(dan)固(gu)醇(chun)(chun)酯轉化(hua)(hua)為FC；進一步 利用膽(dan)(dan)(dan)固(gu)醇(chun)(chun)氧(yang)化(hua)(hua)酶催化(hua)(hua)FC 氧(yang)化(hua)(hua)，生(sheng)成△4-膽(dan)(dan)(dan)甾烯酮和(he)(he)H2O2；后利用過氧(yang)化(hua)(hua)物酶催化(hua)(hua)H2O2 氧(yang)化(hua)(hua) 4-氨(an)基安替(ti)比林(lin)和(he)(he)酚，生(sheng)成紅色醌類化(hua)(hua)合(he)物；在(zai)500nm 有(you)特(te)征吸收峰(feng)，其(qi)顏(yan)色深淺與(yu)TC 含(han)量成正 比。 自(zi)備儀器和(he)(he)用品： 可(ke)見分光(guang)光(guang)度計/酶標(biao)儀、可(ke)調式(shi)移液槍、微量石英(ying)比色皿/96 孔板。

操作步驟:

一、TC 的提取：

1、 組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)中TC 的提取(qu)：按照組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)質(zhi)量(liang)（g）：試(shi)劑一(yi)體積(mL)為(wei)1：5~10 的比(bi)例（建議稱取(qu)約0.1g 組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)，加入1mL 試(shi)劑一(yi)）進行冰浴勻漿，8000g4℃離心10min，取(qu)上(shang)清，即TC待(dai)測液(ye)。

2、 細(xi)胞(bao)、細(xi)菌中(zhong)TC 的提取(qu)：先(xian)收集400-500 萬(wan)細(xi)胞(bao)或細(xi)菌到離心(xin)管內，棄上清，加1mL試(shi)劑一， 超聲波破碎1min（強度20％，超聲2s，停1s），8000g4℃離心(xin)10min，取(qu)上清，即TC 待測液。

3、 血清(qing)（漿(jiang)）等樣(yang)品：直接(jie)測定。

二、測定操作：

1. 分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)預熱30min，調節波長到500nm，蒸餾(liu)水(shui)調零。

2. TC 工作液置于37℃水(shui)浴30min。

3. 標(biao)(biao)準管(guan)：在1mL 玻璃比色皿(min)中依次加入(ru)50μLTC 標(biao)(biao)準品和150μLTC 工作液，混勻，靜(jing)置24h 后 于(yu)500nm 處(chu)比色，記(ji)為(wei)A 標(biao)(biao)準管(guan)。

4. 測定管：在1mL 玻璃比色(se)皿中依次加入50μLTC 待(dai)測液(ye)(ye)和150μLTC 工作(zuo)液(ye)(ye)，混勻(yun)，靜(jing)置24h后 于500nm 處比色(se)，記為(wei)A 測定管。

注意(yi)：標準管只需測定一次(ci)。

相關文獻：

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