產品名稱:E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶
產品型號:
產品特點:E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶 產品介紹TS-UNG酶基因來源于低溫微生物,經大腸桿菌重組表達獲得的新型溫度敏感型UNG酶。該酶與常規UNG酶相同,能夠催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶,對RNA無活性,主要應用于PCR擴增產物的防污染。
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E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶
產品介紹:
TS-UNG酶基因來源于低溫微生物,經大腸桿菌重組表達獲得的新型溫度敏感型UNG酶。該酶與常規UNG酶相同,能夠催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶,對RNA無活性,主要應用于PCR擴增產物的防污染。TS-UNG酶與常規UNG酶相比,對溫度敏感、易于滅活,從而避免了常規UNG酶滅活后殘留活性對熒光PCR靈敏度及擴增產物的降解作用。
TS-UNG酶可以在25℃~50℃范圍內使用,在37℃左右(you)具有(you)大反應活性(xing)。建議在37℃,10min消化含dUTP模板,在50℃,10min或95℃,2min進行滅活。利用TS-UNG酶低溫消化、低溫滅活的特性,TS-UNG酶可以用于RT-PCR防止擴增污染。
活性定(ding)義:
37℃條件下,1小(xiao)時降解1μg含(han)dU堿基的(de)單(dan)鏈(lian)DNA的(de)酶量為1單(dan)位。
規格:1U/μl
儲存緩沖液:
20 mM Tris-HCl,pH 7.5(25℃),100 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1% Triton X-100,50% glycerol.
保(bao)存條(tiao)件:
保存(cun)(cun)于-20℃。并避免保存(cun)(cun)時反復凍融。
反應條(tiao)件(jian):
1、反應體系(xi):
Component | Volume per Reaction(μl) | Concentration in Master Mix |
Template | * | < 1μg/reaction |
Primer 1 | 1~5 | 0.2~1.0μM |
Primer 2 | 1~5 | 0.2~1.0μM |
d NTPs (replace dTTP for 200μM~600μM dUTP) | 1 | 200μM(dATP、dGTP、dCTP) |
10×PCR Buffer | 5 | 1× |
25mM MgCl2 | 2~8 | 1.0~4.0mM |
Taq(5U/μl) | 0.25 | 1.25U |
TS-UNG(1U/μl) | 0.2~0.5 | 0.2~0.5U |
H2O | * | —— |
Total volume | 50μl |
2、Incubate the product for 10min at 37℃;
3、Inactivate TS-UNG by heating to 50℃ for 10min,or 95℃ for 2min;
質量控(kong)制:
1、SDS-PAGE電泳純度大于98%;
2、無核酸(suan)外切酶(mei)(mei)和(he)核酸(suan)內切酶(mei)(mei)活性、RNase酶(mei)(mei)活性;
注意事項:
1、由于不(bu)同目(mu)的基因堿基組成(cheng)不(bu)同,因此(ci)對TS-UNG酶的敏(min)感度也不(bu)同,建議(yi)根據(ju)試驗結果(guo),在0.2~0.5U之間選(xuan)擇TS-UNG適(shi)合(he)用量。
2、避免多次凍(dong)融,切(qie)勿暴露(lu)在溫度波(bo)動較大(da)之(zhi)處。溫度波(bo)動對產品的穩定性有(you)極大(da)影響。3、TS-UNG酶可以在PCR反(fan)應(ying)(ying)前(qian)清除(chu)不慎污染的U-DNA分子。為(wei)有(you)效防止污染,一(yi)個實驗室(shi)必(bi)須在所(suo)有(you)的PCR反(fan)應(ying)(ying)中均(jun)使(shi)(shi)用dUTP作為(wei)dNTPs組分之(zhi)一(yi)進行擴增,使(shi)(shi)所(suo)有(you)擴增產物都成為(wei)U-DNA。
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