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產品名稱:瓊脂糖凝(ning)膠CL-4B

產品型號:

產品報價:

產品特點:瓊脂糖凝膠CL-4B
是在瓊脂糖凝膠4B的基礎上通過交聯使微球的剛性增強,理化性能提高,有利用于工業生產。

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瓊脂糖凝膠CL-4B的詳細資料:

瓊脂糖凝膠CL-4B

貨號(hao):S8741

規(gui)格:10ml/100ml/500ml

產(chan)品(pin)說明 

瓊脂糖凝膠CL-4B是在瓊脂糖凝膠4B的基礎上通(tong)過交聯使微(wei)球的剛性增強,理化性能提高,有(you)利用于(yu)工業生產(chan)。該介質用于(yu)生物大分子(zi)的凝膠層(ceng)析。本品(pin)呈白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉(rou)眼可見雜(za)質。本產品(pin)具有很高的化學穩定(ding)性(xing)、高流速(su)、較(jiao)好(hao)的機械(xie)性(xing)能(neng)、可(ke)多次(ci)重(zhong)復使用等特點,非特異性(xing)吸(xi)附低(di),回收率高,可(ke)用有機溶劑(ji)及(ji)1~2mol/L 的NaOH在(zai)位清洗,適用于工業規模生(sheng)產,廣泛用于生(sheng)物(wu)制藥和生(sheng)物(wu)工程(cheng)下游蛋白質、核酸及(ji)多肽(tai)的凝(ning)膠色(se)譜(pu)純化。

項目

說明

基質

4%交聯(lian)瓊脂糖(tang)

排阻(zu)極限

6×104~2×107 (球蛋白)

形(xing)狀

球形

粒徑

45~165 μm

檢測(ce)流速

30 cm/h*

耐(nai)熱

pH7水中12020min

耐壓(ya)

0.025 MPa

pH穩定性(xing)

3~13(長時(shi)(shi)間(jian)),2~14(短時(shi)(shi)間(jian),在位清洗(xi))

化學穩定性

可(ke)(ke)耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍;可(ke)(ke)耐有機溶劑,如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡(bi)啶、乙腈

檢測條件

層析柱10mm×300mm  *柱床(chuang)高(gao)15cm,25,流動(dong)相為0.1mol/LNaCl

 

瓊脂糖凝膠CL-4B操作步驟:(僅(jin)供參(can)考)

1、裝柱

凝膠(jiao)過(guo)濾(lv)介質(zhi)的(de)使用(yong)對裝(zhuang)(zhuang)柱(zhu)(zhu)的(de)要(yao)求(qiu)較高(gao),為了保證分(fen)離(li)效果,一(yi)般通過(guo)柱(zhu)(zhu)子(zi)上(shang)加一(yi)個(ge)裝(zhuang)(zhuang)柱(zhu)(zhu)器(qi)來(lai)使分(fen)離(li)柱(zhu)(zhu)裝(zhuang)(zhuang)滿凝膠(jiao),或(huo)采(cai)用(yong)帶(dai)有軸向加壓(ya)裝(zhuang)(zhuang)置的(de)柱(zhu)(zhu)子(zi)。凝膠(jiao)柱(zhu)(zhu)床(chuang)一(yi)般高(gao)于(yu)60cm。裝(zhuang)(zhuang)柱(zhu)(zhu)效果可用(yong)染料或(huo)丙酮-水溶液(ye)進行檢驗。

以下過(guo)程(cheng)為(wei)通(tong)用介質裝填過(guo)程(cheng)。若為(wei)帶有(you)軸向加壓(ya)裝置的柱(zhu)(zhu)子,可在(zai)柱(zhu)(zhu)床穩定后將柱(zhu)(zhu)床壓(ya)緊,接好管路。

(1)讓所有的材(cai)料和試劑達到室溫。配制(zhi)緩沖液。凝膠層析(xi)上樣、平衡和洗脫只(zhi)用一種低鹽濃度的緩沖液。

(2)選擇一(yi)根一(yi)定直(zhi)徑的柱子,長(chang)約30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍(bei)),清洗掉20%乙醇,抽干,用(yong)緩(huan)沖(chong)液(按凝膠:緩(huan)沖(chong)液=3:1的比(bi)例)配成勻漿。

(3)將(jiang)柱內及柱子底端用(yong)水或(huo)緩沖(chong)液(ye)潤濕并保持一小段(duan)液(ye)位(液(ye)面略高于濾膜),務必(bi)使底端無氣(qi)泡。

(4)用玻(bo)璃棒引導勻漿(jiang)沿著柱內(nei)壁(bi)一次性倒(dao)入柱內(nei),注(zhu)意勿使產生氣(qi)泡。打開(kai)柱子(zi)出液口,使凝膠在柱內(nei)自由沉降,連結好(hao)柱子(zi)頂端柱頭。

5打開(kai)蠕動泵,讓緩沖液用(yong)使用(yong)時流速的1.33倍的流速流過,使柱(zhu)(zhu)床(chuang)穩定。用(yong)緩沖液平衡(heng)柱(zhu)(zhu)子(zi),到(dao)柱(zhu)(zhu)床(chuang)穩定。

6)推薦用(yong)一個裝柱(zhu)器輔助裝柱(zhu)。裝完后(hou)柱(zhu)床上端輕(qing)輕(qing)刮平,上好柱(zhu)頭。

2、平衡:讓緩沖液(ye)以一定流(liu)速流(liu)過柱子,到(dao)流(liu)出(chu)液(ye)電導和pH不變(bian)。

3、上樣(yang):

(1)樣品用緩沖液(ye)配(pei)制,要(yao)離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的(de)樣品要(yao)先做(zuo)處理(li),再(zai)上樣。

(2)介(jie)質對樣品組分(fen)的(de)分(fen)離是按組分(fen)分(fen)子(zi)量(liang)大小進行的(de),分(fen)子(zi)量(liang)大的(de)先流出(chu)來。

(3)上樣體(ti)積約為柱體(ti)積的1~2%,越(yue)小分離越(yue)好。

4、洗脫:用(yong)緩沖液洗脫,洗脫中保持(chi)流速、緩沖液組成不變。

5、再生:一(yi)般用緩沖(chong)液洗到平衡,可(ke)再次(ci)使用。

6、在位清洗

(1)對于以(yi)(yi)離(li)子鍵結合上去(qu)(qu)的蛋白,可(ke)以(yi)(yi)用2M Nacl去(qu)(qu)除。

(2)對沉淀蛋白(bai)(bai)、對以疏(shu)水性結合的蛋白(bai)(bai)或(huo)脂類,可(ke)用1M NaOH 去除(chu)。

(3)對強疏水性結合的蛋(dan)白(bai)、脂類等,用(yong)4~10倍(bei)柱體(ti)積的70%乙(yi)醇或30%異(yi)丙醇清洗,但要注(zhu)意有機溶劑(ji)的濃度以(yi)梯(ti)度的方式逐漸(jian)增(zeng)加(jia),否則容易產生(sheng)氣泡。

清洗完畢(bi)后,用少3倍緩沖液平衡柱子。

7、去熱(re)源

用0.5M的氫(qing)氧(yang)化(hua)鈉(na)清洗柱子5~6小(xiao)時(shi)(shi)或(huo)用0.1M的氫(qing)氧(yang)化(hua)鈉(na)24小(xiao)時(shi)(shi)。或(huo)用以下方(fang)法步驟去除:

(1)2倍(bei)柱體(ti)積的70%乙(yi)醇;

(2)2倍柱(zhu)體積50mM Tris-HCl pH7.5;

(3)1倍(bei)柱體積(ji)4M尿素;

(4)3倍柱體積的Tris緩(huan)沖液(ye)+0.1M NaCl;

以上緩沖液都在無熱源(yuan)的(de)雙蒸水中配(pei)制。

8、 消毒:用0.5~1M NaOH室溫下(xia)洗8~10倍柱(zhu)體積,初始緩沖液平(ping)衡柱(zhu)子。

注意事項

在(zai)裝柱(zhu)、使用和保存柱(zhu)子(zi)的時候,要避免柱(zhu)子(zi)流干,氣泡進入

產品應(ying)密封貯存在4~25(保存溶液(ye)為20% 乙醇(chun)),通風(feng)、干燥、清潔的(de)地(di)方。不(bu)能(neng)冷凍。

用過的(de)柱子貯(zhu)存在(zai)4(20% 乙醇)。

本產(chan)品避免與氧(yang)化劑接觸;避免長(chang)時間暴露在空氣中

保質期:5年。

 

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