產品名稱:Solarbio 葡(pu)聚(ju)糖(tang)凝膠G-50
產品型號:S8151-25
產品特點:Solarbio 葡聚糖凝膠G-50應 用:利用分子篩作用,進行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定性 狀:白色微球,多孔
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Solarbio 葡聚糖凝膠G-50
有效期 | 6個月 |
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英文名稱 | Sephadex G-50 medium |
儲存條件 | RT |
外觀(性狀) | 白色粉末 |
單位 | 瓶 |
說明:分離試(shi)劑,層析介質(zhi)。
應 用(yong)(yong):利用(yong)(yong)分(fen)子(zi)篩作(zuo)用(yong)(yong),進行多(duo)肽(tai)分(fen)離、脫鹽、清洗(xi)生物提(ti)取液、分(fen)子(zi)量測定
性(xing) 狀:白(bai)色微球,多(duo)孔
凝(ning)膠類型(xing):凝(ning)膠過濾(lv)填料,親水型(xing)凝(ning)膠
結構成分:交(jiao)聯(lian)右旋糖酐
粒(li) 徑(jing):細顆粒(li)20-80µm,中顆粒(li)50-150µm,粗顆粒(li)100-300µm
工作(zuo)PH值:2-10
操(cao)作(zuo)溫度:4-40℃
球蛋白分(fen)離范圍:1500-30000
保存條(tiao)件(jian):4-25℃
化學和物理性質:
葡聚糖凝膠(jiao)是一種珠狀的(de)凝膠(jiao),含有(you)(you)大量(liang)的(de)羥基,很容易(yi)在水中(zhong)和電解質溶(rong)(rong)液中(zhong)溶(rong)(rong)脹。 G型的(de)葡聚糖凝膠(jiao)有(you)(you)各(ge)種不同的(de)交聯度,因(yin)此(ci)它們(men)的(de)溶(rong)(rong)脹度和分級分離范(fan)圍也有(you)(you)所不同。 葡聚糖凝膠(jiao)的(de)溶(rong)(rong)脹度基本上不因(yin)鹽(yan)和洗(xi)滌劑(ji)的(de)存在而受影響。
葡聚糖(tang)(tang)凝膠有不同的(de)粒度。超細級(ji)(ji)的(de)葡聚糖(tang)(tang)凝膠是用(yong)于(yu)(yu)需要*分辨率的(de)柱色(se)(se)(se)譜(pu)和薄層色(se)(se)(se)譜(pu)。粗級(ji)(ji)和中級(ji)(ji)的(de)凝膠用(yong)于(yu)(yu)制備(bei)性色(se)(se)(se)譜(pu)過(guo)程,可(ke)在較(jiao)低的(de)壓力下獲得較(jiao)高的(de)流速。 另(ling)外,粗級(ji)(ji)也可(ke)用(yong)于(yu)(yu)批量工藝。
化學穩定性:
葡聚糖凝(ning)膠不溶(rong)于一切(qie)溶(rong)劑(除非它被(bei)化學降解)。 它在水(shui)、鹽(yan)溶(rong)液、有機(ji)溶(rong)劑、堿和(he)弱(ruo)酸性溶(rong)液中(zhong)都是穩定(ding)的,在強酸中(zhong)凝(ning)膠骨架的糖昔鍵被(bei)水(shui)解。 長期接(jie)觸(chu)氧化劑將破壞凝(ning)膠,因而應避免使(shi)用。
物理穩定性:
葡(pu)(pu)聚糖(tang)(tang)疑膠(jiao)并不熔(rong)融,可以在(zai)濕態、中性PH進行滅菌或(huo)在(zai)高壓滅菌器120℃、30分鐘而(er)不影響(xiang)它的(de)色譜性質。 干態的(de)凝(ning)膠(jiao)加熱120℃以上(shang)將開(kai)始焦糖(tang)(tang)化。 葡(pu)(pu)聚糖(tang)(tang)凝(ning)膠(jiao)的(de)機械強度取(qu)決于交聯度。
使用方法:
1. 葡聚糖凝膠預處(chu)理:
在室溫下,將(jiang)葡(pu)聚糖凝膠干粉浸泡(pao)于(yu)蒸餾(liu)水(shui)中少(shao)24小(xiao)時,并不(bu)斷攪拌以保證凝膠溶脹,或者用(yong)熱水(shui)浸泡(pao)(不(bu)建議煮(zhu)沸(fei))少(shao)1小(xiao)時直充分溶脹,凝膠體(ti)積不(bu)再變化(hua)。
注:在溶脹前(qian),加入蒸餾水攪拌后使其(qi)自然沉降(jiang),沉降(jiang)后若上(shang)層(ceng)溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多,需要重復多次漂洗(xi)將(jiang)其(qi)除去,防止層(ceng)析(xi)時阻塞凝膠柱,影響流速。
2. 裝柱(zhu):
將溶脹(zhang)好的(de)(de)凝(ning)膠根據裝(zhuang)柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態裝(zhuang)柱,并避免柱內產生氣泡或(huo)斷層; 裝(zhuang)柱要均(jun)勻,可(ke)在凝(ning)膠耐(nai)受的(de)(de)操作壓下(xia)裝(zhuang)柱,裝(zhuang)好的(de)(de)凝(ning)膠柱可(ke)以檢(jian)(jian)測(ce)(ce)柱效,檢(jian)(jian)測(ce)(ce)過濾柱裝(zhuang)填(tian)是(shi)否(fou)合格(ge)。
凝(ning)膠層析分(fen)離(li)度取(qu)決于柱高(gao)(gao),為分(fen)離(li)不同組分(fen),凝(ning)膠柱床必須有適宜(yi)的(de)(de)高(gao)(gao)度:分(fen)級分(fen)離(li)時,一般需要 100cm 左右長的(de)(de)層析柱,柱高(gao)(gao)與直徑(jing)之比為 20:1-100:1,柱高(gao)(gao)過高(gao)(gao)時,凝(ning)膠擠(ji)壓變形阻(zu)塞(sai)會(hui)引起(qi)較(jiao)大的(de)(de)反壓,應當盡可能避(bi)免(mian);分(fen)組分(fen)離(li)(例如脫(tuo)鹽)時用短柱,柱高(gao)(gao)控制在40-50cm 以下,柱高(gao)(gao)與直徑(jing)的(de)(de)比約為 5:1-10:1。
3. 平衡:
上(shang)樣前用平(ping)衡液(ye)平(ping)衡層(ceng)析(xi)柱少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得(de)平(ping)穩為止(例如流出液(ye)的PH值等于上(shang)柱的Buffer的PH值);
4. 上樣:
分(fen)級分(fen)離時上(shang)樣(yang)(yang)量一般為5%的柱床體積(ji),我們建議初(chu)次上(shang)樣(yang)(yang)控制在(zai)1-2%的床體積(ji),視分(fen)離情(qing)況可(ke)以調整;脫鹽時上(shang)樣(yang)(yang)量可(ke)以達到20%的柱床體積(ji)。
樣(yang)品溶液如有雜質或(huo)沉淀應(ying)過濾或(huo)離心除去(qu),樣(yang)品的粘度不能過高,否則影響分離效果。
5. 洗脫方法:
可以用(yong)無鹽水,也(ye)可以采用(yong)上柱時的緩(huan)(huan)沖液洗脫(tuo);在上柱緩(huan)(huan)沖液中加入NaCl等梯度洗脫(tuo)或(huo)鹽梯度洗脫(tuo)也(ye)可以*分離純化(hua);
6. 在位清洗(xi)(CIP)
凝(ning)膠使用(yong)(yong)十次后(hou)作(zuo)一次CIP,目的是去(qu)除柱床內(nei)沉淀的及(ji)頑(wan)固殘留的蛋(dan)白。 方法是以40cm/h用(yong)(yong)1M氫(qing)氧化鈉反向清(qing)洗四個(ge)(ge)柱體積,再以少三個(ge)(ge)柱體積平衡緩(huan)沖液再生。
7. 保(bao)存
凝膠(jiao)柱暫時不用(yong),可(ke)將其(qi)回收,一般方法是將凝膠(jiao)用(yong)水沖洗(xi)干凈(jing)濾干,可(ke)加(jia)入0.02%疊(die)dan化鈉(na)防腐或(huo)用(yong)20%乙醇浸泡,以控制(zhi)微生物生長。
Solarbio 葡聚糖凝膠G-50
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