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Solarbio 葡聚糖凝膠G-25

說明：分離(li)試劑，層析介質.

應    用：利(li)用分子(zi)篩(shai)作用，進行緩沖(chong)液交換、脫(tuo)鹽，分離(li)小(xiao)分子(zi)，去除(chu)小(xiao)分子(zi);工業脫(tuo)鹽。

性    狀：白(bai)色(se)微球，多孔

凝膠類型(xing)：凝膠過濾填料，親水(shui)型(xing)凝膠

結(jie)構成(cheng)分：交(jiao)聯右旋糖酐

粒    徑： 細顆(ke)粒20-80µm，中顆(ke)粒50-150µm，粗顆(ke)粒100-300µm

工作PH值：2-13

操作溫度：4-40℃

球(qiu)蛋(dan)白分離范圍(wei)：1000-5000

保(bao)存(cun)條件：4-25℃

化學和物理性質:

葡聚糖(tang)凝膠(jiao)是一種(zhong)珠狀(zhuang)的凝膠(jiao)，含有(you)大量的羥基(ji)，很容易在水中和電(dian)解質溶(rong)液中溶(rong)脹(zhang)。 G型的葡聚糖(tang)凝膠(jiao)有(you)各種(zhong)不同(tong)(tong)的交聯度(du)，因此它們的溶(rong)脹(zhang)度(du)和分(fen)級分(fen)離范圍也有(you)所不同(tong)(tong)。 葡聚糖(tang)凝膠(jiao)的溶(rong)脹(zhang)度(du)基(ji)本上不因鹽和洗滌劑的存(cun)在而受(shou)影響。

葡聚(ju)糖(tang)凝膠有不(bu)同(tong)的粒度。超細級(ji)的葡聚(ju)糖(tang)凝膠是用(yong)于(yu)需要(yao)*分辨(bian)率(lv)的柱(zhu)色(se)譜(pu)和(he)薄(bo)層色(se)譜(pu)。粗級(ji)和(he)中級(ji)的凝膠用(yong)于(yu)制備性色(se)譜(pu)過程(cheng)，可在較低的壓力下(xia)獲得較高(gao)的流速(su)。 另外，粗級(ji)也可用(yong)于(yu)批量(liang)工藝。

化學穩定性:

葡聚糖凝(ning)膠不溶(rong)于一切溶(rong)劑(ji)(除非它被(bei)化學降解(jie))。 它在水、鹽溶(rong)液、有機(ji)溶(rong)劑(ji)、堿和弱酸(suan)性溶(rong)液中都是穩定的(de)，在強酸(suan)中凝(ning)膠骨架的(de)糖昔鍵被(bei)水解(jie)。 長期接觸氧化劑(ji)將破壞凝(ning)膠，因而應避免使用。

物理穩定性:

葡(pu)(pu)聚(ju)糖(tang)疑膠并不(bu)熔(rong)融，可以(yi)在(zai)濕態、中(zhong)性PH進行滅菌(jun)或在(zai)高(gao)壓滅菌(jun)器120℃、30分鐘而不(bu)影響它的(de)色譜性質。 干態的(de)凝(ning)膠加熱120℃以(yi)上將開始焦(jiao)糖(tang)化(hua)。 葡(pu)(pu)聚(ju)糖(tang)凝(ning)膠的(de)機械強度取決于交聯(lian)度。

使用方法:

1. 葡聚糖凝膠預(yu)處理：

在室溫下，將葡聚(ju)糖凝(ning)(ning)膠干粉(fen)浸(jin)泡于(yu)蒸(zheng)餾水(shui)中少24小(xiao)時(shi)，并不(bu)斷攪拌(ban)以保證凝(ning)(ning)膠溶脹，或者用熱(re)水(shui)浸(jin)泡（不(bu)建議(yi)煮沸）少1小(xiao)時(shi)直充分溶脹，凝(ning)(ning)膠體積不(bu)再變化。

注(zhu)：在溶(rong)脹前，加入蒸餾水攪拌后使其自然沉降(jiang)，沉降(jiang)后若上層(ceng)(ceng)溶(rong)液中(zhong)漂浮的凝膠(jiao)碎(sui)片顆粒較(jiao)多，需要重復多次漂洗將其除去，防止層(ceng)(ceng)析時阻塞凝膠(jiao)柱，影響流速。

2. 裝柱：

將溶脹(zhang)好的凝(ning)(ning)膠根據裝柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)要求一(yi)次性置(zhi)入柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)內(nei)，注意保(bao)持濕態裝柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)，并(bing)避免柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)內(nei)產生氣(qi)泡或斷(duan)層(ceng); 裝柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)要均勻，可(ke)在凝(ning)(ning)膠耐受的操作壓下裝柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)，裝好的凝(ning)(ning)膠柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)可(ke)以檢測(ce)柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)效，檢測(ce)過濾柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)裝填(tian)是否(fou)合格。

凝膠層析分(fen)離度取決于柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)高(gao)(gao)，為分(fen)離不同組(zu)(zu)分(fen)，凝膠柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)床必須有適宜的(de)高(gao)(gao)度：分(fen)級(ji)分(fen)離時(shi)，一般需要 100cm 左(zuo)右長的(de)層析柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)，柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)高(gao)(gao)與直(zhi)徑(jing)之比為 20:1-100:1，柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)高(gao)(gao)過高(gao)(gao)時(shi)，凝膠擠壓變形阻塞會(hui)引(yin)起較(jiao)大(da)的(de)反壓，應當(dang)盡可能避免；分(fen)組(zu)(zu)分(fen)離（例如(ru)脫鹽）時(shi)用(yong)短柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)，柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)高(gao)(gao)控制在40-50cm 以下，柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)高(gao)(gao)與直(zhi)徑(jing)的(de)比約(yue)為 5:1-10:1。

3. 平衡：

上樣前用(yong)平(ping)衡液平(ping)衡層析柱少3-5個(ge)柱體積(ji)直到(dao)記錄儀基線變得平(ping)穩為止(zhi)（例如流出液的(de)PH值等(deng)于上柱的(de)Buffer的(de)PH值）；

4. 上(shang)樣：

分級(ji)分離時上樣(yang)量一(yi)般為5%的柱(zhu)床(chuang)體積，我們建議初次上樣(yang)控制(zhi)在(zai)1-2%的床(chuang)體積，視分離情(qing)況可以(yi)調整(zheng);脫鹽時上樣(yang)量可以(yi)達到(dao)20%的柱(zhu)床(chuang)體積。

樣品溶液(ye)如有雜質(zhi)或沉淀應(ying)過濾(lv)或離(li)心除(chu)去，樣品的粘度不能過高，否則影響分離(li)效果。

5. 洗脫方法:

可以(yi)用無鹽(yan)水，也可以(yi)采用上(shang)柱時的緩(huan)沖液(ye)洗脫(tuo)；在上(shang)柱緩(huan)沖液(ye)中加(jia)入NaCl等(deng)梯度(du)洗脫(tuo)或鹽(yan)梯度(du)洗脫(tuo)也可以(yi)*分離純化；

6. 在位清洗(CIP)

凝膠使用(yong)十次后作一(yi)次CIP，目(mu)的(de)是(shi)去除柱(zhu)床內沉淀的(de)及頑(wan)固殘留(liu)的(de)蛋白。 方法(fa)是(shi)以(yi)40cm/h用(yong)1M氫(qing)氧化鈉反向清(qing)洗四個柱(zhu)體(ti)積(ji)，再以(yi)少三個柱(zhu)體(ti)積(ji)平(ping)衡緩(huan)沖液再生(sheng)。

7. 保存

凝膠柱(zhu)暫時不用(yong)，可將(jiang)其回收，一般方法是將(jiang)凝膠用(yong)水沖洗干凈(jing)濾干，可加(jia)入0.02%疊dan化鈉防腐或用(yong)20%乙醇(chun)浸泡，以控制微生物(wu)生長。

Solarbio 葡聚糖凝膠G-25