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低熔點瓊脂糖

貨號：A8350
規格：2.5g/5g/100g

• 英文名稱：Agarose(Low melting gel)

• CAS：9012-36-6

• 分子式：C10H15N3O3

• 儲存條件：避光常溫

• 外觀（性狀）：粉末

• 單位：瓶

    DNA、脂蛋白和免(mian)疫(yi)電泳用(yong)；由于其低熔點的特(te)性特(te)別適(shi)用(yong)于DNA等回收(shou)。

    A low-melting agarose that melts between 62-68 °C and remains liquid for several hours at 37°C. Ideal for purification of macromolecules from agarose slices and for in-gel enzymatic manipulations.

    DNase (P/F)

    EEO (-Mr)    0.12

    Gel Strength (1.0%) (g/cm2)   250

    Gelling Range (1.0%) (°C)   24 - 29

    Melting Range (°C)  62 - 68

    Moisture (%)   < 10

    Protease (P/F)

    RNase (P/F)

    Sulfate (%)   0.1

    正(zheng)確的加(jia)熱方式對瓊(qiong)脂(zhi)糖的充分(fen)溶解和凝結(jie)關重要，在此，我們提供以下(xia)幾點作為正(zheng)確制備(bei)瓊(qiong)脂(zhi)糖凝膠的操作參考。

?  瓊脂糖加(jia)熱溶解所需時間(jian)短(duan)。

?  瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂糖在TAE或者TBE緩沖液(ye)中不(bu)(bu)溶(rong)解(jie)，加熱(re)時，瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂糖顆粒水(shui)化(hua)形成溶(rong)液(ye)，水(shui)化(hua)是(shi)時間依賴(lai)的(de)，不(bu)(bu)同的(de)瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂糖水(shui)化(hua)點不(bu)(bu)同。瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂糖純度高，超微顆粒，非常適合作為電泳實驗載體(ti)。對比于其他的(de)瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂糖，瓊(qiong)(qiong)(qiong)脂糖水(shui)化(hua)速度快，使用者無需煮沸過長時間，否則易導致膠液(ye)濃稠，不(bu)(bu)利于混勻，凝膠后(hou)易破(po)損(sun)。

瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠(jiao)制備

    用1×TBE溶(rong)液配(pei)制1%濃度瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠

    1.用于(yu)制備(bei)膠液(ye)的錐形瓶(ping)體(ti)(ti)積(ji)應為膠液(ye)體(ti)(ti)積(ji)的2-4倍，緩(huan)慢向(xiang)緩(huan)沖(chong)液(ye)中(zhong)加入瓊脂糖，邊加邊攪拌(ban)，防止瓊脂糖聚集。記(ji)錄瓶(ping)體(ti)(ti)和溶液(ye)總重(zhong)量。

    2.微波(bo)(bo)爐(lu)高(gao)火加熱30s，根據配(pei)制的溶液體積調整加熱時間。加熱時間與微波(bo)(bo)爐(lu)、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關。

    3.搖勻瓊脂糖(tang)溶液。

    4.再(zai)次高(gao)火加熱30s，搖勻瓊脂糖溶(rong)液。

    5.將(jiang)溶液(ye)(ye)再次(ci)放回微波爐，高火加熱沸騰(teng)（大約10-35s）。接觸移動(dong)時(shi)瓊脂(zhi)糖(tang)膠液(ye)(ye)可(ke)能會劇(ju)烈沸騰(teng)，小心操(cao)作，避免燙傷。從(cong)微波爐拿出后，室溫冷(leng)卻1-2min，輕(qing)輕(qing)搖晃使(shi)液(ye)(ye)體里的氣泡溢出。

    6.重新放(fang)回微波爐，高火加熱，使之沸(fei)騰約15s，觀察瓊脂糖的溶(rong)解狀態，如果仍有顆(ke)粒(li)存在，重復該步驟直所有晶體全部溶(rong)解。

    7.待瓊脂糖*溶解成液體，重(zhong)(zhong)新稱量(liang)(liang)總(zong)重(zhong)(zhong)量(liang)(liang)，計(ji)算蒸發液體量(liang)(liang)，用水補齊原(yuan)始重(zhong)(zhong)量(liang)(liang)，搖(yao)勻(yun)液體。

    8.建議膠(jiao)液冷卻50-55℃時灌(guan)膠(jiao)，有利于(yu)凝膠(jiao)孔(kong)徑均(jun)勻*，不(bu)于(yu)損傷制(zhi)膠(jiao)儀。灌(guan)膠(jiao)前(qian)輕(qing)輕(qing)搖(yao)晃瓊脂糖溶液，釋放膠(jiao)液中殘(can)存(cun)的氣(qi)泡。

    9.向制膠(jiao)槽中灌(guan)膠(jiao)，一般膠(jiao)的厚度(du)3-5mm，灌(guan)膠(jiao)后盡量排(pai)除梳(shu)孔之間或底部(bu)的氣泡。

  &nbsp; 10.在室溫放置（30-45min）使膠充(chong)分凝(ning)結。

如果要制(zhi)備不同濃度和不同體積的凝膠，請注意以下兩(liang)點：

    1.在(zai)凝膠溶液煮沸前少進行2次(ci)搖勻。

    2.膠(jiao)液(ye)沸騰后，每隔(ge)10-15s觀察(cha)一次膠(jiao)液(ye)溶解程度(du)（間(jian)隔(ge)時間(jian)取決于膠(jiao)液(ye)濃度(du)和(he)體積(ji)）。

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 相關文獻：

《The Synergistic Antibacterial Properties of Glycinin Basic Peptide against Bacteria via Membrane Damage and Inactivation of Enzymes》 作者:Hou Qi NingYing Qiu LiEmail authorZhao Sheng WangEmail authorHai Zhen Mo 期刊:Food Biophysics 影響因子:2.051 PMID:
《Role of large plasmid DNA in salt tolerance of a novel strain》 作者:Uddin, M., Jiti, Z., Saleh, M., Ekram, A., Sikdar, B., & Zaman, S 期刊:International journal of biological 影響因子:4.057 PMID:
 

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