產品名稱:A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低熔點(dian)瓊脂糖
產品型號:A8350
產品特點:A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低熔點瓊脂糖⊙應用:·具有更高的分辨率,適用于DNA/RNA電泳。 ·65℃以下凝膠融化,適宜膠回收。 · 在37℃以下保持流動,適用于凝膠內進行的酶促反應、組織培養、細胞克隆以及病毒空斑實驗
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A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低熔點瓊脂糖
CAS 39346-81-1
外觀 白色粉末
EEO ≤ 0.10
凝(ning)膠溫度 26℃-30℃ (1.5% gel)
融膠(jiao)溫度 ≤65℃ (1.5% gel)
溶解性 無色清澈膠(jiao)液
水分 ≤ 10%
凝膠(jiao)強度 ≥200g/cm2(1.0% gel)
硫化物(SO42-) ≤ 0.10%
灰分 ≤ 0.5%
DNA酶(mei) & RNA酶(mei) 不得檢出
蛋白酶 不(bu)得檢出
正確的加熱方式對瓊脂糖的充分溶解和凝結關重要,在此,我們提供以下幾點作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考。
1.瓊脂糖(tang)加熱(re)溶解所(suo)需時間(jian)短。
2.瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)在TAE或者TBE緩沖液(ye)中不溶解,加熱時,瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)顆粒水化(hua)形成溶液(ye),水化(hua)是時間依賴的(de),不同的(de)瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)水化(hua)點不同。瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)純度(du)(du)高,超微顆粒,非(fei)常適合作(zuo)為(wei)電泳(yong)實驗載體。對比于其他(ta)的(de)瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang),瓊脂(zhi)(zhi)糖(tang)水化(hua)速度(du)(du)快,使(shi)用者無需(xu)煮沸過長時間,否則易導致膠(jiao)液(ye)濃(nong)稠,不利(li)于混(hun)勻,凝膠(jiao)后易破損。
3.熔點范圍:62-68℃ ,凝膠溫(wen)度 ( 1.0%):24-29℃
瓊脂糖凝膠制備
用1×TBE溶液(ye)配(pei)制1%濃度瓊脂糖(tang)凝膠
1.用于制備膠(jiao)液的錐形(xing)瓶體積應為膠(jiao)液體積的2-4倍,緩慢向緩沖液中(zhong)加入瓊脂糖(tang),邊(bian)加邊(bian)攪拌,防止(zhi)瓊脂糖(tang)聚集。記錄瓶體和(he)溶液總(zong)重量。
2.微(wei)波爐(lu)高火加熱(re)30s,根據配制的溶液體(ti)積調(diao)整加熱(re)時(shi)間。加熱(re)時(shi)間與微(wei)波爐(lu)、瓶體(ti)大小和瓊脂糖(tang)濃度有關。
3.搖勻瓊脂(zhi)糖溶液。
4.再次高火加(jia)熱30s,搖勻瓊脂(zhi)糖溶(rong)液(ye)。
5.將溶液再次放回微波爐(lu),高火加(jia)熱沸騰(大約10-35s)。接觸(chu)移動時(shi)瓊脂糖膠液可(ke)能會(hui)劇烈沸騰,小(xiao)心操作,避(bi)免燙傷。從微波爐(lu)拿出后,室溫冷卻1-2min,輕輕搖晃(huang)使液體里的氣泡溢出。
6.重新放回微波爐,高火加熱,使之沸騰約(yue)15s,觀察瓊脂糖的(de)溶解(jie)狀態,如果仍有顆(ke)粒存在(zai),重復該(gai)步驟直(zhi)所有晶體全部溶解(jie)。
7.待瓊脂糖*溶(rong)解成(cheng)液體,重新稱量(liang)總重量(liang),計算蒸發液體量(liang),用水(shui)補齊原始重量(liang),搖(yao)勻液體。
8.建議(yi)膠(jiao)(jiao)(jiao)液(ye)冷卻50-55℃時(shi)灌膠(jiao)(jiao)(jiao),有利于凝膠(jiao)(jiao)(jiao)孔徑均勻*,不于損傷制膠(jiao)(jiao)(jiao)儀。灌膠(jiao)(jiao)(jiao)前(qian)輕輕搖晃瓊脂糖溶(rong)液(ye),釋放膠(jiao)(jiao)(jiao)液(ye)中殘存的氣泡。
9.向制膠(jiao)槽中(zhong)灌(guan)膠(jiao),一般膠(jiao)的厚度3-5mm,灌(guan)膠(jiao)后盡量排除梳孔之間或底部的氣(qi)泡。
10.在(zai)室溫放(fang)置(30-45min)使膠充分(fen)凝結。
如果要制備不同濃度和不同體積的凝膠,請注意以下兩點:
1.在凝膠溶液煮(zhu)沸前少進(jin)行2次(ci)搖勻(yun)。
2.膠液(ye)沸騰后,每隔10-15s觀察一(yi)次膠液(ye)溶解程度(間(jian)隔時間(jian)取(qu)決于膠液(ye)濃度和體積)。
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