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索萊寶彩虹180廣譜蛋白(bai)Marker（11-180KD）1怎(zen)么用
貨號 ： PR1910
規格 ： 20T (100µ1)/50T(250µ1) /100T(250µ1×2) /500T(250µ1×10)
保存 ： -20℃保存，有效期少2年。

蛋白質marker指的是(shi)做western時,用來參照(zhao)的標準蛋(dan)白(bai),顯(xian)示(shi)蛋(dan)白(bai)大(da)小,用以與自(zi)己蛋(dan)白(bai)進(jin)行對比,估計蛋(dan)白(bai)大(da)小。在(zai)免疫印跡(ji)（Western blot）試驗中(zhong)，分子量Marker雖不起眼(yan)，但意義重(zhong)大(da)，是(shi)陽性對照(zhao)，是(shi)大(da)小的標準，是(shi)必須的。

蛋白marker的分類：

一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量標準

未(wei)染色的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白分(fen)(fen)子(zi)量標(biao)準是(shi)簡單，也(ye)是(shi)準確(que)的(de)(de)(de)(de)一(yi)種。由于沒有附帶(dai)染料(liao)分(fen)(fen)子(zi)或者是(shi)標(biao)記(ji)(ji)分(fen)(fen)子(zi)，所(suo)示大小正好(hao)(hao)(hao)是(shi)蛋(dan)白原(yuan)本的(de)(de)(de)(de)大小，是(shi)判斷蛋(dan)白大小必(bi)須的(de)(de)(de)(de)。現(xian)在(zai)(zai)的(de)(de)(de)(de)marker多數都(dou)(dou)選用預(yu)(yu)混和的(de)(de)(de)(de)Marker，方便不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)同大小的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白比較(jiao)。預(yu)(yu)混的(de)(de)(de)(de)Marker通(tong)常有幾(ji)條(tiao)(tiao)(tiao)帶(dai)加倍濃度作為指示，因為混合(he)的(de)(de)(de)(de)條(tiao)(tiao)(tiao)帶(dai)越(yue)多，越(yue)不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)好(hao)(hao)(hao)記(ji)(ji)，誰知道哪條(tiao)(tiao)(tiao)是(shi)那(nei)條(tiao)(tiao)(tiao)!數到(dao)眼都(dou)(dou)花了(le)。所(suo)以當看到(dao)特別濃的(de)(de)(de)(de)那(nei)幾(ji)條(tiao)(tiao)(tiao)標(biao)志(zhi)帶(dai)就記(ji)(ji)得是(shi)哪里了(le)。不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)過要記(ji)(ji)得，小帶(dai)通(tong)常都(dou)(dou)不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)那(nei)么容易看清(qing)楚的(de)(de)(de)(de)。在(zai)(zai)選擇上(shang)來說，當然(ran)是(shi)選擇其中少(shao)有一(yi)條(tiao)(tiao)(tiao)條(tiao)(tiao)(tiao)帶(dai)和自己的(de)(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白大小相(xiang)近的(de)(de)(de)(de)好(hao)(hao)(hao)，越(yue)近越(yue)好(hao)(hao)(hao)。如(ru)果你的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)幸在(zai)(zai)兩(liang)條(tiao)(tiao)(tiao)跨度較(jiao)大Marker條(tiao)(tiao)(tiao)帶(dai)之間，選別的(de)(de)(de)(de)Marker吧。預(yu)(yu)混的(de)(de)(de)(de)Marker使(shi)用上(shang)不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)如(ru)預(yu)(yu)染Marker(pre-stained)好(hao)(hao)(hao)用，因為電泳過程中*看不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)到(dao)，要和目標(biao)蛋(dan)白一(yi)起等到(dao)后染色才“開蠱”，無法對(dui)(dui)實驗起預(yu)(yu)示參照作用。*屬于“后知后覺(jue)”型的(de)(de)(de)(de)，當然(ran)還是(shi)比“不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)知不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)覺(jue)”不(bu)(bu)(bu)(bu)(bu)做(zuo)對(dui)(dui)照的(de)(de)(de)(de)要好(hao)(hao)(hao)。

① 寬分子量蛋白標準

如果從實驗室總體考(kao)慮(lv)的(de)，就選范圍(wei)盡量(liang)(liang)寬(kuan)，條帶分布比較均勻的(de)，這樣你的(de)蛋(dan)白無論在(zai)哪(na)個區(qu)間(jian)都容易判(pan)斷(duan)，避免正好落在(zai)一段空白區(qu)的(de)危(wei)險(xian)。不(bu)過條帶越多，每次上樣量(liang)(liang)也就越費。拿到Marker后，如果買的(de)是(shi)大(da)包裝，就應該考(kao)慮(lv)分裝。多次反復凍融(rong)對于蛋(dan)白的(de)危(wei)險(xian)，不(bu)用多說吧。另外(wai)要記得，寬(kuan)譜的(de)Marker不(bu)一定每條都能(neng)(neng)看到的(de)，特別是(shi)Mini?Cell。如果側重大(da)蛋(dan)白，那小的(de)可能(neng)(neng)就已經跑掉了，不(bu)是(shi)質量(liang)(liang)不(bu)好哦。

② 高分(fen)子(zi)量蛋(dan)白標(biao)準

通常(chang)在檢測大分子量(liang)蛋(dan)白(bai)經常(chang)使用到高分子量(liang)蛋(dan)白(bai)標準。

③低分子(zi)量蛋白marker標準

在一般(ban)的(de)蛋(dan)白(bai)電(dian)泳(yong)當中，更常用的(de)是低蛋(dan)白(bai)標準(zhun)分子量，除了有(you)指示(shi)蛋(dan)白(bai)大小的(de)作用以外，有(you)時還(huan)可以用作粗略的(de)定量。實驗(yan)室用在一般(ban)蛋(dan)白(bai)電(dian)泳(yong)的(de)低分子量蛋(dan)白(bai)標準(zhun)中。

在低分(fen)子量蛋(dan)白標(biao)(biao)準(zhun)這里還包括可特(te)別小的蛋(dan)白標(biao)(biao)準(zhun)，比如(ru)30kD以(yi)下蛋(dan)白或者多肽(tai)的分(fen)離辨別。其(qi)中GE的從2kD到16kD之(zhi)間有(you)6條帶的蛋(dan)白標(biao)(biao)準(zhun)挺不(bu)錯。

二.預染蛋白分子量標準

預染蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)分(fen)(fen)子量是(shi)(shi)一(yi)(yi)些(xie)純化好的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)混合物(wu)，通過(guo)(guo)與染料(liao)共價(jia)耦聯，在(zai)(zai)電(dian)(dian)泳(yong)(yong)過(guo)(guo)程中或(huo)者轉膜時可以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)直(zhi)接(jie)觀察(cha)到(dao)。預染蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)分(fen)(fen)子量的(de)(de)(de)出(chu)現方(fang)便了我(wo)們(men)的(de)(de)(de)實(shi)驗，這種蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)分(fen)(fen)子量標(biao)(biao)準(zhun)可以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)幫(bang)助我(wo)們(men)在(zai)(zai)電(dian)(dian)泳(yong)(yong)時、電(dian)(dian)泳(yong)(yong)后，以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)及轉膜后監(jian)測(ce)電(dian)(dian)泳(yong)(yong)情(qing)況和估計遷(qian)移率——比如，已知垂(chui)直(zhi)電(dian)(dian)泳(yong)(yong)分(fen)(fen)辨(bian)區域大(da)約(yue)在(zai)(zai)膠的(de)(de)(de)2/3處，如果使用(yong)預染Marker就可以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)預測(ce)目標(biao)(biao)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)進入分(fen)(fen)辨(bian)區時停止電(dian)(dian)泳(yong)(yong)以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)得(de)到(dao)分(fen)(fen)辨(bian)效果;如果觀察(cha)到(dao)Marker電(dian)(dian)泳(yong)(yong)異常也可以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)及時終止電(dian)(dian)泳(yong)(yong);另外在(zai)(zai)Western Blot轉膜以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)后可以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)直(zhi)接(jie)觀察(cha)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)轉膜是(shi)(shi)否(fou)*，還(huan)可以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)在(zai)(zai)膜上(shang)標(biao)(biao)記蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)分(fen)(fen)子量，所以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)吸引了許多實(shi)驗室人員(yuan)購買預染蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)標(biao)(biao)準(zhun)。值得(de)注意的(de)(de)(de)是(shi)(shi)預染蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)Marker與染料(liao)共價(jia)耦聯，所以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)在(zai)(zai)不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)緩沖(chong)條(tiao)件下電(dian)(dian)泳(yong)(yong)時遷(qian)移特性(xing)可能會發生某(mou)些(xie)變化，可能導(dao)致(zhi)一(yi)(yi)些(xie)偏差(cha)，所以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)不(bu)太適(shi)合定位蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)——不(bu)過(guo)(guo)多數情(qing)況下Marker的(de)(de)(de)條(tiao)帶未必能和我(wo)們(men)的(de)(de)(de)目標(biao)(biao)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)*一(yi)(yi)樣，我(wo)們(men)得(de)到(dao)的(de)(de)(de)也不(bu)過(guo)(guo)是(shi)(shi)一(yi)(yi)種相對Marker指示的(de)(de)(de)參考大(da)小(xiao)(xiao)，后都需要Western來定性(xing)，所以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)如果不(bu)是(shi)(shi)要區分(fen)(fen)大(da)小(xiao)(xiao)相近的(de)(de)(de)條(tiao)帶，預染Marker還(huan)是(shi)(shi)很好用(yong)的(de)(de)(de)，而且也可以(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)和未染色的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)標(biao)(biao)準(zhun)一(yi)(yi)起使用(yong)。

預染(ran)蛋白(bai)標準可(ke)以(yi)分(fen)為兩種(zhong)：單色(se)(se)預染(ran)和多(duo)色(se)(se)預染(ran)，其(qi)(qi)實(shi)區別就在(zai)于幫(bang)助(zhu)在(zai)實(shi)驗過程中(zhong)辨認某個條帶的(de)(de)(de)大小——Marker條帶越多(duo)參考價值(zhi)越大，可(ke)就越難辨認區分(fen)，如(ru)(ru)果(guo)(guo)用(yong)不同的(de)(de)(de)顏色(se)(se)來區別就比(bi)較好辨認啦。如(ru)(ru)果(guo)(guo)沉悶(men)的(de)(de)(de)電(dian)泳(yong)實(shi)驗中(zhong)跑出五顏六色(se)(se)的(de)(de)(de)彩虹(hong)Marker，此時心(xin)情想必會愉快一(yi)些(xie)!單色(se)(se)的(de)(de)(de)Marker通常是(shi)利用(yong)其(qi)(qi)中(zhong)某些(xie)條帶加倍濃度(du)來提示其(qi)(qi)大小的(de)(de)(de)。還(huan)有一(yi)點特別要注意，由于轉膜(mo)(mo)是(shi)一(yi)個將膠里的(de)(de)(de)Marker濃縮在(zai)潔(jie)白(bai)的(de)(de)(de)膜(mo)(mo)上，所以(yi)需(xu)要的(de)(de)(de)上樣量相對(dui)少(shao)一(yi)些(xie)，如(ru)(ru)果(guo)(guo)想要在(zai)電(dian)泳(yong)過程中(zhong)看(kan)到美麗(li)的(de)(de)(de)“彩虹(hong)”，或者單色(se)(se)的(de)(de)(de)Marker往往需(xu)要比(bi)說明書里多(duo)加一(yi)些(xie)Marker的(de)(de)(de)。

三、Western的蛋白分子量標準

①生物素標記蛋(dan)白標準

未(wei)染(ran)色(se)的(de)Marker在(zai)(zai)(zai)做Western時，需要(yao)(yao)在(zai)(zai)(zai)印跡前先用麗春紅或者(zhe)是(shi)SYPRO熒(ying)光蛋(dan)(dan)白(bai)染(ran)色(se)液(ye)等不(bu)(bu)(bu)(bu)干(gan)擾(rao)Western Blot的(de)染(ran)色(se)方(fang)法顯色(se)，在(zai)(zai)(zai)膠上做標(biao)(biao)記后(hou)才(cai)能“拼”在(zai)(zai)(zai)后(hou)的(de)結(jie)果中(zhong)，如(ru)果是(shi)預染(ran)的(de)Marker就要(yao)(yao)在(zai)(zai)(zai)轉(zhuan)膜后(hou)標(biao)(biao)記膜，或者(zhe)剪膜，后(hou)在(zai)(zai)(zai)“拼上”。要(yao)(yao)是(shi)想直接(jie)將Marker結(jie)果顯示在(zai)(zai)(zai)后(hou)結(jie)果上，不(bu)(bu)(bu)(bu)用手工作圖或者(zhe)拼接(jie)，那(nei)就要(yao)(yao)Western的(de)Marker了。比如(ru)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)標(biao)(biao)記的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)標(biao)(biao)準。這種(zhong)方(fang)法主要(yao)(yao)是(shi)配合化學(xue)發(fa)光法：在(zai)(zai)(zai)蛋(dan)(dan)白(bai)分(fen)(fen)子量(liang)上標(biao)(biao)記生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)，通(tong)過帶(dai)有抗(kang)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)的(de)抗(kang)體(ti)或者(zhe)偶(ou)聯(lian)鏈親霉素(su)(su)的(de)抗(kang)體(ti)，在(zai)(zai)(zai)化學(xue)發(fa)光檢測到目(mu)的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)帶(dai)時就可以同(tong)(tong)時看(kan)到相應的(de)分(fen)(fen)子量(liang)標(biao)(biao)準一(yi)起發(fa)光顯影了。不(bu)(bu)(bu)(bu)同(tong)(tong)于普通(tong)蛋(dan)(dan)白(bai)分(fen)(fen)子量(liang)標(biao)(biao)準的(de)便宜、預染(ran)蛋(dan)(dan)白(bai)分(fen)(fen)子量(liang)的(de)方(fang)便，這一(yi)方(fang)法的(de)優點是(shi)與Marker和目(mu)的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)對應性(xing)好，同(tong)(tong)時在(zai)(zai)(zai)同(tong)(tong)張片上顯示，不(bu)(bu)(bu)(bu)用拼接(jie)，利于分(fen)(fen)析。缺點是(shi)如(ru)果樣(yang)品中(zhong)帶(dai)有生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)背景，那(nei)個抗(kang)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)抗(kang)體(ti)有可能影響結(jie)果，而且反應體(ti)系太過復雜也(ye)會干(gan)擾(rao)實(shi)驗結(jie)果。

②特殊標記蛋白標準

在經過修飾(shi)的(de)(de)蛋白(bai)標準(zhun)中(zhong)，除了生(sheng)物素標記(ji)以外，近些年由于下游(you)蛋白(bai)操作的(de)(de)豐富化與復雜化，也出現帶(dai)有(you)“尾巴”的(de)(de)蛋白(bai)標準(zhun)。比如(ru)(ru)His-Tag，如(ru)(ru)果(guo)每個Marker條帶(dai)都有(you)His –tag，那(nei)二抗添加(jia)His-Taq抗體很容(rong)易將Marker條帶(dai)顯示在Western結果(guo)上。很方(fang)便，問題就是有(you)可能有(you)潛在的(de)(de)干擾，比如(ru)(ru)樣品中(zhong)正好有(you)類似Histag的(de)(de)結構。不過這可以通過對照(zhao)檢測的(de)(de)。

北京索萊寶科技有限公司為生化試劑供應商，生產銷售生化試劑、生物試劑、實驗耗材、細胞培養基等產品。蛋白marker為索萊寶的(de)常(chang)備貨產品，其產品種類(lei)齊全，是(shi)廣大科研工(gong)作者的(de)信賴直選(xuan)。

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