產品名稱:預染超(chao)低分子量蛋白(bai)質Marker
產品型號:PR1900
產品特點:預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)怎么使用貨 號 : PR1900規 格 : 20T(200µ1)本產品包含預染的3種多肽和2種低分子量蛋白質組成,分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD。
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預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)
英文名稱 | Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD) |
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儲存條件 | -20℃,有效期1年 |
產品簡介
預染超低分子量蛋白質Marker(3.3kD-31.0kD)
本產(chan)品包含預(yu)染(ran)的(de)3種多(duo)肽和2種低分子量(liang)蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)組(zu)成,分子量(liang)范圍為3. 3kD-31. 0kD。可以用于直接觀察蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)電(dian)泳狀(zhuang)況(kuang)以及清(qing)晰(xi)地判斷Western Blot的(de)轉膜(mo)效果。經Tricine-甘油SDS-PAGE凝(ning)膠電(dian)泳時以及轉移到PVDF或NC膜(mo)上可看到清(qing)晰(xi)的(de)5條藍色的(de)蛋(dan)白(bai)(bai)條帶。本品為蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)和多(duo)肽混合物的(de)凍干粉,每種預(yu)染(ran)蛋(dan)白(bai)(bai)含量(liang)約為40μg,配有一支1×上樣緩(huan)沖液(ye)。
使用說明:
1. 開封后,溶(rong)于200 μ1 1×上樣(yang)緩沖液,可根據需要(yao)進行小量分裝,每管(guan)10 μl,-20℃貯存,每次(ci)取一管(guan)使用,避免反復凍融。
2. 使用前取分裝后的小管室溫(wen)融化(hua)后即(ji)可上樣(yang)電泳。
示意圖:
凝膠制(zhi)備及染色注意(yi)事(shi)項:
1. 先配制分離(li)膠(jiao)(jiao),聚合后(hou)再配制夾層膠(jiao)(jiao),后(hou)配制濃縮(suo)膠(jiao)(jiao),3種膠(jiao)(jiao)的制膠(jiao)(jiao)體(ti)積比為4:1.5:1。電泳(yong)(yong)時(shi),30V跑(pao)1-2h后(hou),待(dai)指(zhi)示(shi)前沿到達分離(li)膠(jiao)(jiao)上(shang)沿時(shi),把電壓調100V,電泳(yong)(yong)結束,整個電泳(yong)(yong)過(guo)程大約需要6-8h。
2. 電泳之(zhi)后可將膠(jiao)置(zhi)于固(gu)定(ding)液中固(gu)定(ding)20min,再進行(xing)染色(se)(se)(se),能(neng)得到較好的(de)蛋(dan)白(bai)條(tiao)帶;如時間不允許(xu),也(ye)可不進行(xing)固(gu)定(ding)直接染色(se)(se)(se)。如果(guo)使用配方7進行(xing)染色(se)(se)(se)時效果(guo)不好或考慮其毒(du)(du)性,請選擇本公(gong)司的(de)考馬斯亮藍蛋(dan)白(bai)膠(jiao)快速染色(se)(se)(se)液(貨號(hao):P1300),該(gai)產品(pin)具有染色(se)(se)(se)快,無毒(du)(du),靈(ling)敏性高等特(te)點,是常(chang)規染色(se)(se)(se)液的(de)替代品(pin)。
3. 由于多(duo)(duo)肽所含(han)的氨基酸(suan)(suan)數目較少,因(yin)此如該多(duo)(duo)肽含(han)有(you)過多(duo)(duo)的極性氨基酸(suan)(suan)(堿性或(huo)酸(suan)(suan)性),則(ze)會影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分(fen)子量可(ke)能和(he)多(duo)(duo)肽的氨基酸(suan)(suan)理論推算分(fen)子量有(you)一定距離。
4. 由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白(bai)質對(dui)數分(fen)(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)和遷移率成正比直線關(guan)系的分(fen)(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)范(fan)圍(wei)為15,000-200,000,因此對(dui)于分(fen)(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)小(xiao)于10000的蛋白(bai)質或多(duo)肽(tai)的分(fen)(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang),只(zhi)能(neng)根據標準分(fen)(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)進行估計,推斷其是否(fou)落入預測的分(fen)(fen)子(zi)(zi)量(liang)(liang)范(fan)圍(wei)。
5. 由于(yu)超低分子量多肽(tai)(3000及3000以下),極易從凝膠(jiao)(jiao)上(shang)浸出,因此(ci)染色及脫(tuo)色時間不(bu)宜太長,脫(tuo)色后(hou)凝膠(jiao)(jiao)也不(bu)宜在水中浸泡保(bao)存過(guo)久(jiu),否則(ze)條帶(dai)會消(xiao)失。
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