產品名稱:凋亡(wang)檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI
產品型號:CA1050
產品特點:凋亡檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使 PS 暴露在細胞膜外表面。PS 是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使 PS 暴露在細胞膜外。
免費咨詢(xun):010-50973185
凋亡檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI
產品簡介:
細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)凋亡(wang)早(zao)期改變發(fa)(fa)生(sheng)(sheng)在(zai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)表(biao)面(mian),這些細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)表(biao)面(mian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)改變之(zhi)一是(shi)磷(lin)脂(zhi)酰絲氨(an)酸(PS)從細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)內轉移到細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)外(wai),使 PS 暴露(lu)(lu)在(zai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)外(wai)表(biao)面(mian)。PS 是(shi)一種(zhong)帶負電荷的(de)(de)(de)(de)(de)(de)磷(lin)脂(zhi),正常主要存在(zai)于細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)內面(mian),在(zai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)發(fa)(fa)生(sheng)(sheng)凋亡(wang)時細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)上的(de)(de)(de)(de)(de)(de)這種(zhong)磷(lin)脂(zhi)分(fen)布的(de)(de)(de)(de)(de)(de)不(bu)對稱(cheng)性被(bei)破壞(huai)而使 PS 暴露(lu)(lu)在(zai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)外(wai)。Annexin V 具(ju)有易(yi)于結合到磷(lin)脂(zhi)類如 PS 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)特(te)性,對 PS 有高度的(de)(de)(de)(de)(de)(de)親和(he)性。因(yin)此,該蛋白可(ke)充(chong)當一敏感(gan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)探針檢測暴露(lu)(lu)在(zai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)表(biao)面(mian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de) PS。PS 轉移到細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)外(wai)不(bu)是(shi)凋亡(wang)所*的(de)(de)(de)(de)(de)(de),也可(ke)發(fa)(fa)生(sheng)(sheng)在(zai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)壞(huai)死(si)中。兩種(zhong)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)死(si)亡(wang)方(fang)式間的(de)(de)(de)(de)(de)(de)差別是(shi)在(zai)凋亡(wang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)初始階段細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)是(shi)完好的(de)(de)(de)(de)(de)(de),而細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)壞(huai)死(si)在(zai)其早(zao)期階段細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)(mo)(mo)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)完整性就破壞(huai)了。因(yin)此,可(ke)以采用 AnnexinV 與PI 雙染的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa),通過流式檢測細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)早(zao)期凋亡(wang)。
操作步驟:
標記的 Annexin V 可結合流式細胞儀用于檢測細胞外膜上的磷酯酰絲氨酸
1.用去離子水按 1:4 稀釋結合緩沖液(4ml 結合緩沖液+12ml 去離子水);
2.用 4℃預冷的 PBS 洗細胞兩次,用 250ul 結合緩沖液重新懸浮細胞,調節其濃度為 1× 106/ml;
3.取 100µl 的細胞懸液于 5ml 流式管中,加入 5µl Annexin V/Alexa Fluor 647 和 10µl 20ug/ml的碘化丙錠溶液;
4. 混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘;
5. 在反應管中加 400µl PBS,流式(shi)細胞儀(FACS)分析
相關文獻:
《The establishment of clonally derived chicken embryonic fibroblast cell line (CSC) with high transfection efficiency and ability as a feeder cell》 作者:Ruifeng Zhao , Jing Jin , Xinyu Sun , Kai Jin , Man Wang , Mahmoud F. Ahmed , Qisheng Zuo , Yani Zhang ,Zhenhua Zhao , Guohong Chen , Bichun Li 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影響因子:3.062 PMID:30076744
凋亡檢測試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI
相關同類產品: |