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還原型(xing)谷胱甘肽（reduced glutathione, GSH）含量測定試劑盒說(shuo)明書(shu)

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?產品簡介：

GSH/GSSG是細(xi)胞(bao)內(nei)重要的氧(yang)化(hua)還原對(dui)之(zhi)一。因此，測定細(xi)胞(bao)內(nei)GSH和GSSG含(han)量以及(ji)GSH/GSSG比值，能夠很好地反映(ying)細(xi)胞(bao)所處(chu)的氧(yang)化(hua)還原狀態。

DTNB與GSH反應生成(cheng)復(fu)合(he)物，在412nm處(chu)有特征吸(xi)收(shou)峰；其吸(xi)光度變(bian)化(hua)與GSH含量成(cheng)正比。

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?試(shi)驗中所需(xu)的儀(yi)器和(he)試(shi)劑：

可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計、低溫離心機、水浴(yu)鍋、可調節移液器、1ml比色皿、雙蒸(zheng)水

產品(pin)內容：

試劑一×1支，充分溶(rong)解于50ml雙蒸水，4℃保(bao)存

試(shi)劑二×1支，充分溶解于50ml雙蒸水(shui)中(zhong)，4℃保存(cun)

試劑三(san)×1支，充分溶解于10ml雙蒸水中，4℃避光保存

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?操作步驟：

一、樣品前處理(li) ：   

取組(zu)織(zhi)約0.1g，加1ml試劑(ji)二，冰上充分研磨，8000rpm 4℃離(li)心10min，取上清(qing)(qing)。（如上清(qing)(qing)不清(qing)(qing)澈，再離(li)心3min）

GSH測定操作：

測定前將試劑一(yi)于25℃水浴20min

按每100mg組(zu)織加入1000µL生理鹽水(shui)的比例進行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置(zhi)冰上待測。   

對(dui)于非哺乳動物組織：按每100mg組織加(jia)入1000µ;L提(ti)取(qu)液的(de)比例進行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘，取(qu)上(shang)清，置(zhi)冰上(shang)待(dai)測。

（2）血清（漿）樣品：直接(jie)檢測。

二、測(ce)定(ding)操(cao)作表：

迅速(su)混勻(yun)，于412nm測吸光值(zhi)，并記(ji)錄(lu)第(di)60s的OD值(zhi)

GSH含(han)量計(ji)算(suan)：

GSH標準曲線公式：y=0.0015x+0.0818（x為GSH濃度(du)，y為吸(xi)光值）

液體(ti)中GSH（μmol/L）=[（OD測定(ding)管-OD空(kong)白(bai)管）-0.0818]/0.0015×樣(yang)品稀釋倍數(shu)

組織中GSH計(ji)算：

①GSH（μmol/mg prot）=[（OD測定管-OD空白(bai)管）-0.0818]/0.0015×樣品稀釋倍數(shu)÷樣品蛋白(bai)濃度（Cpr）

②GSH（μmol/g mass）=[（OD測(ce)定管(guan)-OD空白管(guan)）-0.0818]/0.0015×樣品(pin)稀釋(shi)倍數÷樣品(pin)質(zhi)量(liang)（g）

注(zhu)意(yi)事項：

（1）樣品處理等過(guo)程均需要在冰上進(jin)行，且須(xu)在當日(ri)測定酶活力，以免影(ying)響(xiang)其活力測定時，除試劑(ji)一外，其它試劑(ji)均需放置在冰上；

（2）樣(yang)本測定前先取(qu)1-2個樣(yang)做預實驗，如吸(xi)光(guang)值太高（超過標(biao)(biao)準曲(qu)線范圍(wei)，即(ji)y＞0.2時），應先用(yong)試劑二稀釋到適當(dang)倍數，使得吸(xi)光(guang)值在標(biao)(biao)準曲(qu)線范圍(wei)內。

(3)處理(li)后樣品不能(neng)用于蛋白濃度(du)測(ce)定