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4',6-二脒基-2-苯基吲哚 DAPI solarbio

DNA鏈熒光染色。

DAPI是一種(zhong)可(ke)以穿透細胞膜的(de)藍色熒光染料(liao)。和(he)雙(shuang)鏈DNA結合后可(ke)以產生比DAPI自(zi)身強(qiang)20多倍的(de)熒光。和(he)EB(ethidium bromide)相(xiang)比，對雙(shuang)鏈DNA的(de)染色靈(ling)敏度要高很多倍。

DAPI染(ran)(ran)色(se)常(chang)(chang)用于細胞(bao)凋亡檢測(ce)，染(ran)(ran)色(se)后用熒光(guang)顯(xian)微鏡觀察或流式細胞(bao)儀檢測(ce)。DAPI也常(chang)(chang)用于普通的細胞(bao)核染(ran)(ran)色(se)以及某些(xie)特(te)定(ding)情況下的雙鏈DNA染(ran)(ran)色(se)。

DAPI的大激發(fa)波(bo)長為(wei)(wei)340nm，大發(fa)射波(bo)長為(wei)(wei)488nm；DAPI和(he)雙鏈(lian)DNA結(jie)合(he)后，大激發(fa)波(bo)長為(wei)(wei)364nm，大發(fa)射波(bo)長為(wei)(wei)454nm。

本(ben)DAPI溶(rong)液用水(shui)配制，加熱有助于溶(rong)解(jie)。

用于(yu)細胞(bao)核染(ran)色時，推(tui)薦的(de)DAPI工作(zuo)濃度(du)為0.5-10μg/ml。

運輸與保存方法
常溫運輸。粉末在室溫下穩定，需避光儲存。
注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
配制母液
用雙蒸水溶解，終濃度為1mg/ml。本產品不可以用緩沖液直接溶解。-20℃可保存1年，建議分裝保存，避免反復凍融。
使用方法
1.配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10μg/ml）。
2.固定的細胞或組織染色：
對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的后進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI 染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞：少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm，發射波長460nm。
3. 活細胞或組織染色：
a)細胞培養物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培養細胞 10～20 分鐘。
c)用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

d)直接(jie)在熒(ying)光顯微鏡(jing)下觀(guan)察或封片后熒(ying)光顯微鏡(jing)下觀(guan)察。激發波長360nm，發射波長460nm。

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