產品名稱:4',6-二脒基(ji)-2-苯基(ji)吲哚 DAPI
產品型號:D8200
產品特點:4',6-二脒基-2-苯基吲哚 DAPIDAPI是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比,對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。
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4',6-二脒基-2-苯基吲哚 DAPI
有效期 | 3年 |
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溶解性 | 1 mg/mL in water |
別名 | 2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride |
英文名稱 | DAPI,4’,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride (DAPI) |
CAS | 28718-90-3 |
分子式 | C16H15N5·2HCl |
分子量 | 350.25 |
儲存條件 | 2-8℃ |
危險代碼 | R:36/37/38 S:26-36 |
純度 | HPLC≥90% |
外觀(性狀) | 黃色粉末 |
單位 | 支 |
DNA鏈熒光染色。
DAPI是(shi)一種可以穿(chuan)透細胞膜的藍色熒(ying)光染料(liao)。和雙鏈DNA結合(he)后可以產生比(bi)(bi)DAPI自身強20多(duo)倍的熒(ying)光。和EB(ethidium bromide)相比(bi)(bi),對(dui)雙鏈DNA的染色靈敏度(du)要高很(hen)多(duo)倍。
DAPI染(ran)色常用(yong)于細胞(bao)(bao)凋亡檢(jian)測(ce),染(ran)色后用(yong)熒光顯微鏡(jing)觀察或流式細胞(bao)(bao)儀檢(jian)測(ce)。DAPI也(ye)常用(yong)于普(pu)通的細胞(bao)(bao)核染(ran)色以及某些特定(ding)情況下(xia)的雙鏈(lian)DNA染(ran)色。
DAPI的大激發波(bo)長(chang)為340nm,大發射波(bo)長(chang)為488nm;DAPI和雙鏈(lian)DNA結合后,大激發波(bo)長(chang)為364nm,大發射波(bo)長(chang)為454nm。
本DAPI溶液用水配制,加熱有助于溶解。
用于細胞核染色時,推薦的DAPI工作(zuo)濃(nong)度為0.5-10μg/ml。
運輸與保存方法
常溫運輸。粉末在室溫下穩定,需避光儲存。
注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
配制母液
用雙蒸水溶解,終濃度為1mg/ml。本產品不可以用緩沖液直接溶解。-20℃可保存1年,建議分裝保存,避免反復凍融。
使用方法
1.配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10μg/ml)。
2.固定的細胞或組織染色:
對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的后進行。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI 染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞:少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360nm,發射波長460nm。
3. 活細胞或組織染色:
a)細胞培養物中加入適量DAPI染色液,約1/10細胞培養基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培養細胞 10~20 分鐘。
c)用 PBS或合適的緩沖液洗細(xi)胞兩(liang)次。
d)直(zhi)接在熒(ying)光顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)或封片后熒(ying)光顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)。激發波長(chang)360nm,發射波長(chang)460nm。
4',6-二脒基-2-苯基吲哚 DAPI
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