產品名稱:Lowry法(fa)蛋白濃(nong)度測(ce)定(ding)試劑盒(1000T)
產品型號:PC0030-Solarbio
產品特點:Lowry法蛋白濃度測定試劑盒(1000T)Lowry法包括兩步反應:*步是在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將Folin試劑還原,產生深藍色,顏色深淺與蛋白質含量成正比。
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Lowry法蛋白濃度測定試劑盒(1000T)
產品簡介:Lowry法包括兩步反應:*步是在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將Folin試劑還原,產生深藍色,顏色深淺與蛋白質含量成正比。定量范圍為5~100μg/ml蛋白質。Folin試劑顯色反應由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強度稍有不同。
Lowry法蛋白濃度測定試劑盒(1000T)
操作說明(ming): 1.根(gen)據(ju)需要量(liang),取適量(liang) Folin 酚(fen)(fen)甲(jia)試(shi)劑 A 和 B 按 50:1 混(hun)合(he),混(hun)合(he)后有效期為 24 小時,過期失(shi)效。 2.根(gen)據(ju)需要量(liang),取適量(liang) BSA 標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)(pin)用(yong)(yong) PBS 稀(xi)(xi)釋稀(xi)(xi)釋 10 倍濃度(du)(du) 0.5mg/ml。若(ruo)采用(yong)(yong)酶標(biao)(biao)儀法(96 孔(kong)) 3.將標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)(pin)按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加(jia)(jia)到(dao) 96 孔(kong)板中(zhong),加(jia)(jia) PBS 補足到(dao) 20ul。 4.將樣(yang)(yang)品(pin)(pin)作適當稀(xi)(xi)釋(建(jian)議多做幾個梯度(du)(du)),加(jia)(jia) 20ul 到(dao) 96 孔(kong)板的(de)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)孔(kong)中(zhong)。由于移液器在(zai)取小量(liang)時的(de)誤差,標(biao)(biao)準(zhun)線前面的(de)點(dian)誤差比較大,所以盡(jin)可能的(de)讓樣(yang)(yang)品(pin)(pin)點(dian)落在(zai)標(biao)(biao)準(zhun)線 1/2 后。 5.將配好的(de) Folin 酚(fen)(fen)甲(jia)試(shi)劑每(mei)孔(kong)加(jia)(jia)入(ru)(ru) 200ul,輕輕震動,混(hun)勻,室溫放置 10 分(fen)(fen)鐘(zhong)。 6.各孔(kong)加(jia)(jia)入(ru)(ru) 20 微升 Folin 酚(fen)(fen)乙試(shi)劑,迅速混(hun)勻,37℃放置 30 分(fen)(fen)鐘(zhong)。用(yong)(yong)酶標(biao)(biao)儀測定(ding) A650 計(ji)算蛋白濃度(du)(du)。若(ruo)采用(yong)(yong)分(fen)(fen)光光度(du)(du)計(ji)法(接(jie)上(shang)述步驟 2) 3.取八支(或者更多)5ml 離心管,標(biao)(biao)號(hao),按下表(biao)加(jia)(jia)入(ru)(ru)試(shi)劑。 4.混(hun)勻,37℃放置 30 分(fen)(fen)鐘(zhong)。分(fen)(fen)光光度(du)(du)計(ji)測定(ding) A650 計(ji)算蛋白濃度(du)(du)。
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參考文獻:
《CtBP2可通過c-Myc信號傳導促(cu)進前(qian)列腺癌細胞增殖》 作者:昌文張詔郜勇徐志宏張 期刊(kan):基因 影響因子:7.463 PMID:
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