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核酸純化柱(大柱)

核酸純化的方法及原理如下：

一、PC抽提法

PC 抽(chou)提是(shi)(shi)去除(chu)蛋(dan)白(bai)質(zhi)有(you)效的(de)手段，但超過了該飽和度，裂解體(ti)系(xi)中(zhong)的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)不(bu)會(hui)被一次去除(chu)，必須靠(kao)多(duo)次抽(chou)提，方可(ke)*去除(chu)。且每次抽(chou)提都會(hui)損失部(bu)(bu)分(fen)核(he)酸(suan)(suan)。另(ling)(ling)外，體(ti)系(xi)太粘稠的(de)壞處是(shi)(shi)，蛋(dan)白(bai)質(zhi)難以(yi)(yi)*去除(chu)，以(yi)(yi)及基因組 DNA 會(hui)斷裂得更(geng)厲害，所以(yi)(yi)要注意(yi)裂解液與樣品(pin)的(de)比例(li)。PC 抽(chou)提的(de)另(ling)(ling)外一個用(yong)(yong)途是(shi)(shi)，利用(yong)(yong)酸(suan)(suan)性酚可(ke)以(yi)(yi)部(bu)(bu)分(fen)去除(chu) DNA 的(de)特(te)點(dian)，在(zai) RNA 抽(chou)提時(shi)獲(huo)得 DNA 殘留極(ji)少的(de) RNA。不(bu)過有(you)一點(dian)要提醒的(de)是(shi)(shi)，某些植(zhi)物樣品(pin)，在(zai)去除(chu)某些雜質(zhi)之前，是(shi)(shi)不(bu)能(neng)使(shi)用(yong)(yong) PC 抽(chou)提的(de)，否則核(he)酸(suan)(suan)必定(ding)降解。PC抽(chou)提大的(de)優勢是(shi)(shi)成本低(di)廉，對(dui)實驗條件要求(qiu)較(jiao)低(di)，對(dui)于經費緊張的(de)實驗室(shi)較(jiao)為實用(yong)(yong)。

二、高鹽沉淀法

高鹽沉淀(dian)(dian)蛋(dan)(dan)白質(zhi)/醇沉淀(dian)(dian)方(fang)法，同樣也是一個非常不(bu)錯的(de)(de)(de)方(fang)法。與 PC 抽(chou)提方(fang)法相比(bi)，除(chu)了(le)純度(du)的(de)(de)(de)穩定(ding)性可(ke)(ke)能要低(di)一點外，該方(fang)法幾乎克服(fu)了(le) PC 抽(chou)提的(de)(de)(de)所(suo)有缺(que)點。更快、更輕松的(de)(de)(de)去(qu)除(chu)蛋(dan)(dan)白質(zhi)所(suo)可(ke)(ke)以用(yong)于大規模(mo)抽(chou)提，但其不(bu)足之處(chu)是純度(du) (蛋(dan)(dan)白質(zhi)殘留) 不(bu)夠穩定(ding)，蛋(dan)(dan)白質(zhi)的(de)(de)(de)沉淀(dian)(dian)效(xiao)率在(zai)4℃會更好一些。

三、離心柱法

離(li)心柱純(chun)化(hua)法(fa)，是(shi)(shi)目前(qian)試劑(ji)盒提取廣泛應用(yong)的方法(fa)。其(qi)大特(te)點是(shi)(shi)受人為操(cao)作因素影(ying)響小，純(chun)度的穩定(ding)性很高 (雖(sui)然(ran)純(chun)度不一定(ding)比PC 純(chun)化(hua)方法(fa)更高)。加入(ru)的液體通過(guo)離(li)心后會進入(ru)另外一個離(li)心管中(zhong)，與含有核酸(suan)的柱子*是(shi)(shi)分開的，所以洗滌更*。其(qi)致命弱點是(shi)(shi)樣品過(guo)量，提取效率較低，且需(xu)要反復離(li)心，操(cao)作復雜，成(cheng)本也較高。

四、生物磁珠法

生(sheng)(sheng)物磁(ci)珠(zhu)法(fa)是(shi)將純化介(jie)(jie)質包被在納米級生(sheng)(sheng)物磁(ci)珠(zhu)表面(mian)，通過介(jie)(jie)質對(dui)核酸(suan)的吸附，在外加磁(ci)場下使核酸(suan)附著于磁(ci)珠(zhu)定(ding)向移動，從而達到固液分離(li)純化的作(zuo)用。與其他幾種(zhong)方法(fa)相比，生(sheng)(sheng)物磁(ci)珠(zhu)法(fa)具有很多*的優勢，如(ru)：

①提取靈敏度高（微(wei)量材(cai)料即可提取）

②純化純度高（*與蛋白鹽等雜質分(fen)離）

③提取產量高（每mg磁珠(zhu)能吸附500ug DNA）

核酸純化柱(大柱)

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