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DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染(ran)料

貨號 ：G7140

規格：0.5ml (10000×)

保存：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

注意 ：本產品屬于微量核酸檢測試劑，使用時請按照說明書操作。

產(chan)品簡介 ：

目前常見(jian)的替代 EB 的核酸(suan)染料(liao) SYBR Green I （屬(shu)于(yu)花氰(qing)類染料(liao)） 雖然毒性(xing)(xing)比 EB 低、 靈敏(min)度(du)比 EB 高，但由于(yu)其(qi)化學穩定(ding)(ding)性(xing)(xing)差；此外，SYBR Green I ;在(zai)(zai)電泳(yong)過程中(zhong)能在(zai)(zai) DNA 分子間移位，很容(rong)易使 DNA 條帶模(mo)糊(hu)和(he)扭曲(qu)，電泳(yong)清晰度(du)和(he)分辨率下降。所以在(zai)(zai)實際(ji)應用中(zhong)依然不(bu)能有效替代 EB。本產(chan)品是同時(shi)具有 EB 穩定(ding)(ding)性(xing)(xing)和(he) SYBR Green I 低毒性(xing)(xing)的新性(xing)(xing)核酸(suan)染料(liao)，其(qi)特(te)點(dian)如(ru)下：

1.  低毒。其(qi)主要成分(fen)未(wei)發現對(dui)人體有(you)(you)致癌性(xing)、未(wei)被列入有(you)(you)毒有(you)(you)害品，有(you)(you)利(li)于保(bao)護使(shi)用者的(de)健康(kang)和保(bao)護日益(yi)惡化的(de)環境(jing)。

2.  靈敏(min)。檢測靈敏(min)度跟 EB 相當，能(neng)滿(man)足常規(gui)核(he)酸(suan)電泳實驗(yan)要求。

3.  穩定。對光(guang)、水和熱的穩定性跟 EB 相(xiang)當，可(ke)加入瓊脂糖凝(ning)膠中反(fan)復熔化。

4.  無分子間位移(yi)現象。不會(hui)出(chu)現 SYBR 染料常(chang)見的條(tiao)帶模糊和(he)扭曲(qu)現象。

5.  使用方法(fa)多樣。既可以加(jia)入熔(rong)化的膠(jiao)中，也可以電泳后染(ran)色，還(huan)可用于 PAGE。

6.  跟各種常用的核酸(suan)電泳緩沖液（如 SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼容，但(dan)在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低。

7.  觀察時不需要任(ren)何額外的儀器(qi)設備或(huo) UV 光源(yuan)，可(ke)以(yi)使用現成的觀察 EB 的 300nm UV。

8.  可用于 RNA 染色(se)(也呈綠(lv)色(se))。

9.  DNA 或 RNA 濃度較高時還可(ke)以直接在(zai)日(ri)光(guang)下觀察 （需(xu)要將膠(jiao)放(fang)在(zai)黑色背(bei)景下） 。 由于避免了 UV 對(dui) DNA的傷害，尤其適用(yong)于膠(jiao)回收(shou)實驗。

使用方法:

電泳(yong)中(zhong)染色：

本方(fang)法(fa)是將 DNAGREEN 直接加(jia)入溶化(hua)的凝膠中使(shi)用(yong)(yong)，只適用(yong)(yong)于瓊脂糖(tang)凝膠電泳(yong)，不適用(yong)(yong)于 PAGE。

1.  將 DNAGREEN 直接加入到融(rong)化(hua)(hua)的瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠(jiao)(jiao)中(zhong)， 每 100mL 凝膠(jiao)(jiao)加 310 uL DNAGREEN， 混合(he)均勻后倒膠(jiao)(jiao)。瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠(jiao)(jiao)中(zhong)不能含任何其他染料(liao)（如 EB 和 SYBR Green I，否則(ze)(ze)(ze)會相(xiang)互干擾） 。在 100mL 瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠(jiao)(jiao)中(zhong)加入 DNAGREEN 的量(liang)不要(yao)超過 10 uL，否則(ze)(ze)(ze)背(bei)景增強(qiang)。注意：一定要(yao)保(bao)證瓊(qiong)脂糖(tang)*熔(rong)化(hua)(hua)，尤其是(shi)在*次熔(rong)化(hua)(hua)膠(jiao)(jiao)的時(shi)候，否則(ze)(ze)(ze)未熔(rong)化(hua)(hua)的小顆粒(li)將產生(sheng)跟染料(liao)相(xiang)同的熒(ying)光。

2.  將(jiang) DNA 樣品與 DNA ;上樣液(ye)按比例混合后上樣。注(zhu)意：一定要使用不含 SDS 等去污劑的上樣液(ye)，否則(ze)SDS 會(hui)跟染料結(jie)合，極大(da)地降低靈敏度。

3.  上樣后電泳(yong)，電泳(yong)參數(shu)同(tong)常規的電泳(yong)。

4.  電泳結束后在 300 nm 左右 的 UV 下觀察。

注(zhu)意：不要使用波(bo)長為 260 nm 或(huo) 360 nm 的 UV，否則檢測靈敏度會(hui)降低(di)。如果 DNA 或(huo) RNA 濃(nong)度較(jiao)高，還(huan)可以直接在日光下直接觀察（需要將膠(jiao)放在黑色背景下） ，

避免 UV 對 DNA 的傷害，尤其適用于膠(jiao)回收實(shi)驗(yan)。

5.  用(yong)配(pei)置了(le) 520-550 nm 濾光片(pian)（一般(ban)呈黃色或(huo)深黃色）的(de)(de)(de)相機拍(pai)照(zhao)。注意：不(bu)要使用(yong)與(yu) EB 兼容的(de)(de)(de)紅色濾光片(pian)（它能阻擋 520-550 nm 的(de)(de)(de)光） 。如果(guo)能再加上能濾去 UV 的(de)(de)(de)濾光片(pian)，效(xiao)果(guo)會更好。

6.  后(hou)續 Southern、轉膜或 DNA 膠回收實驗按常規(gui)操作進行。

電泳后染(ran)色：

本方法(fa)是(shi)在電(dian)泳后對 DNA 進行染(ran)色，適用于(yu)瓊(qiong)脂糖凝膠電(dian)泳和 PAGE。但該方法(fa)需要(yao)單獨(du)的染(ran)色處理，染(ran)料用量較(jiao)大(da)，不推薦用于(yu)瓊(qiong)脂糖凝膠的染(ran)色。

1.  按照常(chang)規方(fang)法進行電泳。

2.  用去離(li)子水(shui)將 DNAGREEN 稀(xi)釋(shi) 500 倍后（100 mL 水(shui)需要加 0.2 mL DNAGREEN） ，將凝膠放(fang)入，室溫下搖晃染(ran)色 30 分鐘(zhong)（對瓊脂糖凝膠）或 15 分鐘(zhong)（對 PAGE） 。

3.  用水脫色 10-30 分鐘，具體時(shi)間需根據背景強弱決定。

注意：電泳(yong)后染色液可以反復使(shi)用次數。

疑(yi)難解答: 

Q：本產品可否用于(yu) RNA 染色？

A： 可(ke)以(yi)，不(bu)論 RNA 是在(zai)甲醛變(bian)性膠中電(dian)(dian)泳(yong)，還(huan)是在(zai)普通的 SuperBuffer-2、TBE 或 TAE 膠中電(dian)(dian)泳(yong)，RNA染色后(hou)在(zai) 300nm 下(xia)都跟 DNA 一樣呈(cheng)綠色，

Q：本產品(pin)是(shi)否可以(yi)加(jia)入上樣液中進行染(ran)色(se)？

A：不行，本(ben)產品只能直接加(jia)入凝膠中進(jin)行染色(se)或電泳后再染色(se)。

Q：為(wei)何(he)前(qian)端（靠近正(zheng)極）的 DNA 條帶很淡或根本看不見？

A：跟 EB 一樣，電(dian)泳時(shi) DNAGREEN 朝負(fu)極(ji)方向移動，當(dang)前端的 DNA（小片(pian)段）進入沒有 DNAGREEN的區域時(shi)，已經結合(he)的染(ran)料分子會逐漸從(cong) DNA 分子上(shang)脫落，所以(yi)條帶會變淡或根本看不見。解(jie)決辦法之一是縮(suo)短(duan)電(dian)泳時(shi)間或電(dian)泳后再染(ran)色(se)；之二是在每 100 mL 電(dian)泳緩沖液(ye)中補加(jia) 3-5uL 染(ran)料。

Q：本(ben)產品在哪種(zhong)緩沖液(ye)中(zhong)效果好？

A：DNAGREEN 染(ran)料在(zai)不(bu)(bu)同(tong)(tong)緩沖液中(zhong)背景熒光(guang)強度不(bu)(bu)同(tong)(tong)，從(cong)弱到強的順序是：SuperBuffer-2、TBE、TAE。

在背景(jing)較(jiao)強(qiang)的緩沖液體中(zhong)，可(ke)以適(shi)當降低染料的用(yong)量，比如 100mL 膠中(zhong)加 3-5 uL。濃(nong)度需要稍做(zuo)摸索。

Q：用 SYBR 染色的(de) DNA 在(zai)電泳時為(wei)何容易發生條帶模糊和扭曲現象(xiang)？

A：SYBR 染料一般與(yu) DNA 的(de)小溝結合，但在常(chang)規電泳條件下該結合并不(bu)牢固(gu)，染料分子可以在標記的(de)和未

標記的(de) DNA 分(fen)子(zi)之間(jian)轉(zhuan)移(yi)，使 DNA 分(fen)子(zi)的(de)泳動速度時(shi)快(kuai)（無染料(liao)結(jie)合時(shi)）時(shi)慢（有染料(liao)結(jie)合時(shi)） ，發生條(tiao)帶模糊和扭曲現象。嵌(qian)入(ru)型染料(liao)（如 EB 和本產品(pin)）與 DNA 結(jie)合牢固(gu)，則無此現象。

相關產品 ：

T1050 5×TBE  緩沖液

T1060 50×TAE  緩沖液

E1020 EB 溶液 (10mg/ml)

A1020 40% 丙烯酰胺（ 19:1 ）

D1010 6×DNA Lodding Buffer

M1060  D2000 DNA Ladder

PC1120 2×Taq PCR MasterMix ( ;含染料）

DNA電(dian)泳試劑 DNAGREEN  核酸染(ran)料訂購說明：
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DNA電泳試(shi)劑 DNAGREEN  核酸(suan)染(ran)料(liao)運輸說明：
1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。