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苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒

產品英文名： Micro Phenylalanine Ammonia-lyase (PAL) Assay Kit
產(chan)品貨號(hao)：BC0215                   產(chan)地：北(bei)京市通州區馬(ma)駒橋聯(lian)東U谷8三樓
產品規格：100管/96樣               產品(pin)商標：Solarbio
保存與運(yun)輸：4℃保存或(huo)-20℃保存      參考價格：1280
庫存(cun)狀態：現貨                      
關鍵(jian)字：苯丙(bing)氨酸解氨酶試劑(ji)盒(he)
簡要(yao)介紹：PAL（EC4. 3 1 5）廣(guang)泛(fan)存在(zai)(zai)于各種植(zhi)(zhi)物(wu)(wu)和少數微生(sheng)物(wu)(wu)中(zhong)，是植(zhi)(zhi)物(wu)(wu)體內苯丙烷(wan)類代謝的(de)關(guan)鍵酶，與(yu)一些(xie)重(zhong)要(yao)的(de)次生(sheng)物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)如(ru)木質(zhi)(zhi)素(su)(su)、異黃酮類植(zhi)(zhi)保素(su)(su)、黃酮類色(se)素(su)(su)等合成密切相(xiang)關(guan)，在(zai)(zai)植(zhi)(zhi)物(wu)(wu)正常生(sheng)長發育和抵御病(bing)菌侵害過程中(zhong)起(qi)重(zhong)要(yao)作用。

產品詳(xiang)細介紹
產(chan)品內容(rong)： 
提(ti)取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保(bao)存。
試(shi)劑一：液體(ti) 15mL×1 瓶(ping)，4℃保存(cun)。
試劑二：粉劑×1 瓶(ping)，4℃保(bao)存。臨用前每(mei)瓶(ping)加(jia)入 4mL 雙蒸水(shui)充分(fen)溶(rong)解待用，可(ke) 4℃保(bao)存一周(zhou)。
試劑三：液體 1mL×1 瓶，4℃保存(cun)。
產(chan)品說明(ming)：
PAL（EC4.315）廣泛存在(zai)于各種(zhong)植(zhi)(zhi)物(wu)和少數微生物(wu)中(zhong)(zhong)，是(shi)植(zhi)(zhi)物(wu)體(ti)內苯丙烷類(lei)(lei)代謝的關鍵酶和 限速酶，在(zai)動物(wu)體(ti)內尚未發(fa)現。與一些重(zhong)要的次(ci)生物(wu)質如木質素、類(lei)(lei)黃(huang)酮(tong)(tong)類(lei)(lei)植(zhi)(zhi)保素、黃(huang)酮(tong)(tong)類(lei)(lei)色素等 合成密切(qie)相關，在(zai)植(zhi)(zhi)物(wu)正常生長(chang)發(fa)育、抗病、抗逆(ni)反應中(zhong)(zhong)起重(zhong)要作用。 PAL 催化 L-苯丙氨(an)酸裂(lie)解為反式肉(rou)(rou)桂(gui)酸和氨(an)，反式肉(rou)(rou)桂(gui)酸在(zai) 290nm 處有大(da)吸收值，通過測(ce)定吸光值升高(gao)速率(lv)計算 PAL 活(huo)性。
所(suo)需的儀器(qi)(qi)和(he)用品 紫外(wai)分光(guang)光(guang)度計/酶標儀、水浴鍋、臺(tai)式離心機(ji)、可調式移液器(qi)(qi)、微量石英(ying)比色皿/96 孔板(ban)、研 缽、冰和(he)蒸餾水。
操作步(bu)驟：
一、粗酶液(ye)提取 稱取約 0.1g 組(zu)織(zhi)，加入 1mL 提取液(ye)進行冰浴勻漿。10000g4℃離心 10 分(fen)鐘，取上清，置冰上待測。
二、測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以(yi)上，調節波長 290nm，蒸餾水調零(ling)。
2、在 EP 管或 96 孔板中按順序加入下列試劑

混勻(yun)，靜置 10min 后，290nm 處記錄測定(ding)管(guan)吸光值 A1 和對(dui)照管(guan)吸光值 A2，△A=A1-A2。 注意：對(dui)照管(guan)只要做(zuo)一管(guan) PAL活性(xing)計算

用微量(liang)石英比(bi)色(se)皿測定的計算公式如下 
（1） 按蛋白濃度計算 單(dan)位(wei)的定義(yi)：每(mei) mg 組織蛋白在該反(fan)應體系(xi)中每(mei)分(fen)鐘使(shi) 290nm 下吸光(guang)值變化 0.1 定義(yi)為一個酶活性 單(dan)位(wei)。 PAL（U/mgprot）=ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.1÷T÷Cpr=66.7×ΔA÷Cpr
（2） 按按樣本(ben)鮮(xian)重計算 單(dan)位(wei)的定義(yi)：每 g 組織在該反應體系(xi)中(zhong)分鐘使(shi) 290nm 下吸光值變化 0.1 定義(yi)為(wei)一個(ge)酶活性單(dan)位(wei)。 PAL（U/g 鮮(xian)重）＝ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.1÷T÷W=66.7×ΔA÷W V 樣：加入樣本(ben)體積，5µL；V 樣(yang)(yang)總(zong)：加(jia)入提取液(ye)體(ti)積(ji)，1mL；T：反(fan)應(ying)時間，30min；Cpr：樣(yang)(yang)本 蛋白質濃(nong)度(du)，mg/mL；W：樣(yang)(yang)品質量。
 用(yong) 96 孔板測定的計算公式如下
（1） 按蛋白濃度計算(suan) 單(dan)位的(de)定義：每 mg 組織蛋白在反應體系中每分鐘使 290nm 下(xia)吸(xi)光值變化(hua) 0.05 定義為(wei)一個(ge)酶活(huo)性(xing)單(dan) 位。 PAL（U/mgprot）=ΔA×V 樣(yang)總÷V 樣(yang)÷0.05÷T÷Cpr=133.4×ΔA÷Cpr
（2） 按按樣本鮮重計(ji)算 單位(wei)的定義：每(mei) g 組(zu)織(zhi)在反應體(ti)系中(zhong)每(mei)分鐘使 290nm 下(xia)吸光值變化 0.05 定義為一個(ge)酶活(huo)性單位。 PAL（U/g 鮮(xian)重）＝ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.05÷T÷W=133.4×ΔA÷W V 樣：加(jia)入(ru)(ru)樣本(ben)(ben)體(ti)積，5µL；V 樣總：加(jia)入(ru)(ru)提取液體(ti)積，1mL；T：反應時間，30min；Cpr：樣本(ben)(ben) 蛋白質(zhi)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhi)量。

相關文獻：

《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊(kan):Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:

苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒