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瓊脂糖凝膠親和層析介質 rProtein A

核酸電泳是進行核酸研究的重要手段，是核酸探針、核酸擴增和序列分析等技術所*的組成部分。核酸電泳通常在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進行，濃度不同的瓊脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子篩網孔大小不同的凝膠，可用于分離不同分子量的核酸片段。以下中間介紹的是瓊脂糖核酸電泳操作步驟。

瓊脂糖凝膠親和層析介質 rProtein A

    瓊脂糖核酸電泳操作步驟 

   ; 1.用蒸餾水將制膠模具和梳子(zi)沖洗干凈，放在制膠平板上，封(feng)閉模具邊(bian)緣(yuan)，架好梳子(zi)；

    2.根據欲分離DNA片段大小(xiao)用(yong)凝(ning)膠(jiao)(jiao)緩沖(chong)液配制適宜濃度的瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)(jiao)：準確稱量瓊脂糖干(gan)粉，加入(ru)到配膠(jiao)(jiao)用(yong)的三角燒瓶內，定(ding)量加入(ru)電泳緩沖(chong)液（一般20~30?ml）；

    3.放入到微波爐內加熱(re)熔化(hua)。冷卻片(pian)刻，加入一滴熒(ying)光染料，輕輕旋轉以(yi)充分(fen)混勻凝(ning)(ning)膠溶液，倒入電(dian)泳槽中，待其凝(ning)(ning)固；

    4.室溫下(xia)30~45分鐘后凝(ning)膠*凝(ning)結，小心(xin)拔出梳子，將(jiang)凝(ning)膠安放(fang)在電泳槽內；

    5.向(xiang)電(dian)泳槽(cao)中倒(dao)入電(dian)泳緩沖液，其量以(yi)沒過(guo)膠面1mm為宜(yi)，如樣品孔內有氣泡，應設法(fa)除去(qu)；

    6.在DNA樣品中加(jia)(jia)入10×體積的(de)載樣緩沖液（loading?buffer），混勻后，用槍(qiang)將樣品混合液緩慢加(jia)(jia)入被浸沒的(de)凝膠加(jia)(jia)樣孔內；

    7.接通電(dian)源(yuan)，紅色(se)為(wei)正極(ji)(ji)(ji)，黑色(se)為(wei)負(fu)(fu)極(ji)(ji)(ji)，切記DNA樣品由負(fu)(fu)極(ji)(ji)(ji)往正極(ji)(ji)(ji)泳動(靠近加樣孔的(de)一(yi)端(duan)為(wei)負(fu)(fu))。一(yi)般60～100V電(dian)壓(ya)，電(dian)泳20～40min即可；

    8.根據指示劑泳(yong)動的位(wei)置，判斷(duan)是否終止電泳(yong)；

    9.電(dian)泳完畢，關上電(dian)源，在凝膠成像儀上觀察電(dian)泳帶(dai)及其位(wei)置，并(bing)與核酸分子量(liang)標準Marker比較被(bei)擴增產物(wu)的(de)大小。

    瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,瓊脂糖核酸電泳操作步驟中要注意的是，不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp近50kb的DNA片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和方向恒定的電場下電泳。