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G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒

規格: 1L

保存: 室(shi)溫(15℃-25℃) 干燥(zao)保存，復檢期12 個月。

試劑盒(he)內容： 

**銀(yin) 2g

染色液A 100ml

顯色液B 100ml

顯色液(ye)C 100ml

終止液(ye)D 100ml

注：1L 規格(ge)指可配制的**銀染(ran)色(se)液的體積，實際使用次數根據(ju)PAGE 膠大小不同(tong)而(er)不同(tong)。

二、G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒的簡介:

核(he)酸銀染的原理是銀離子(zi)可(ke)與核(he)酸形成(cheng)穩定的復合物，然(ran)后(hou)用還原劑如甲(jia)醛在堿(jian)性環(huan)境(jing)下(xia)使Ag+還原成(cheng)銀

顆粒(li)，可把核(he)酸電泳帶染(ran)成黑(hei)褐色。它主(zhu)要用(yong)于聚(ju)丙(bing)烯酰胺凝膠電泳染(ran)色。其靈敏度比(bi)EB 高200 倍，該(gai)產品(pin)

整個過程只(zhi)需(xu)要20 分鐘，操作簡單(dan)，靈(ling)敏度高，能檢測到(dao)10ng 以下(xia)的DNA 條(tiao)帶。

三、的使(shi)用操作步驟:

一、染色液(ye)配(pei)制

需(xu)要配(pei)制(zhi)的染(ran)色液體積(ji)根(gen)據(ju)PAGE 膠的大小而定，一般的mini-PAGE 膠需(xu)要20-30mL。配(pei)制(zhi)用(yong)的器皿清(qing)洗

干凈后用(yong)去離子水(shui)涮洗，染色(se)液須用(yong)去離子水(shui)配制，現用(yong)現配。如果配制的溶液體積不是(shi)100mL，可以按(an)比例

改變各成分用(yong)量。

1，**銀染液：稱取0.2g **銀，加入到(dao)90ml 去離子水中*溶(rong)(rong)解，加入10ml 溶(rong)(rong)液A 混勻，現用(yong)現配。

2，顯色液(ye)：分別(bie)取溶(rong)液(ye)B 和溶(rong)液(ye)C 各(ge)10ml 加入80ml 去離子水中混勻，現用現配。

3，終止液：取(qu)終止液D 10ml 加去離子水稀釋100ml，現用現配(pei)。

二、：

1，PAGE 電泳結束后，將PAGE 蛋白膠轉移玻(bo)璃平(ping)皿或搪瓷(ci)盤中，用去離子水漂(piao)洗(xi)兩(liang)遍，每次(ci)2min。

2，將PAGE 膠(jiao)轉移**銀染液中(zhong)，使(shi)染液沒過PAGE 膠(jiao)，室溫(wen)染色10min。可置于(yu)搖(yao)床上緩慢搖(yao)晃，使(shi)

其染色均勻。

3，棄去(qu)染色液(ye)，用去(qu)離(li)子水快速漂洗三次，每次半分(fen)鐘。

4，將PAGE 膠(jiao)轉移顯色(se)(se)液(ye)中，使顯色(se)(se)液(ye)沒過PAGE 膠(jiao)，室溫搖晃顯色(se)(se)條(tiao)帶清晰可見。

5，可(ke)選，將PAGE 膠(jiao)轉移終止(zhi)液中，終止(zhi)顯(xian)色(se)1min。

6，銀染后(hou)PAGE 膠可拍照(zhao)保(bao)存或(huo)用于后(hou)續試驗。

四、PAGE 凝膠(jiao)快速(su)銀染試劑盒的(de)注意事項(xiang)：

1. 銀染主要出現在PAGE 膠的表面，使用薄膠（0.5-0.75mm）可以(yi)提(ti)高(gao)靈敏度。

2. 對于考(kao)馬(ma)斯亮藍(lan)染(ran)色(se)的(de)SDS-PAGE 膠(jiao)，可(ke)用甲醇將膠(jiao)漂洗后，繼續進行銀染(ran)。考(kao)染(ran)過(guo)程中的(de)乙酸會(hui)干

擾(rao)銀染，因此(ci)要確保將(jiang)PAGE 凝膠(jiao)中殘留的乙酸(suan)*洗凈。

3. 不同(tong)蛋(dan)(dan)白質對銀染(ran)的反應是(shi)不一(yi)樣的，尤其是(shi)堿性蛋(dan)(dan)白染(ran)色效果差。因此，不宜用銀染(ran)測定(ding)不同(tong)蛋(dan)(dan)白

的比(bi)例。

4. 染色過程中，緩慢的振(zhen)蕩是必要(yao)的，一般選(xuan)擇40-60 rpm.

5. 凝(ning)膠表面(mian)的裂紋多是由于壓力(li)、手(shou)印(yin)及(ji)表面(mian)干燥所致，所以全程中都應帶(dai)手(shou)套(tao)操作。

6. PAGE 凝膠背景呈(cheng)均一的(de)黑色多是水中的(de)雜質引起的(de)，所以溶液的(de)配制應使用(yong)電(dian)導率小于1 μS 的(de)去離

子水。

7. 如果(guo)染色后(hou)有(you)呈灰塵(chen)或煙霧(wu)狀灰色或棕色的沉淀出(chu)現在凝(ning)膠表(biao)面，可(ke)能是在幾步漂(piao)洗過程中洗得不夠(gou)

*，或是染(ran)色(se)過程時溫度太低。

8. 較(jiao)深的銀染背景(jing)多是丙烯(xi)酰胺中的雜質(zhi)所致。

9. PAGE 膠中的(de)甘(gan)油、尿(niao)素(su)、甘(gan)氨酸、Triton X-100 和兩性電解(jie)質(zhi)這些物(wu)質(zhi)會干擾銀(yin)染。

10. 室溫(wen)(wen)操作時，溫(wen)(wen)度的波動往往會干擾銀染的效果(guo)，恒溫(wen)(wen)水浴可(ke)以解決這個問題。

11. 憑(ping)借戊(wu)二醛預處理可以(yi)使各種蛋白質的染色提高40 倍(bei)。

12. 染色使用(yong)的玻璃器皿必須(xu)非常干凈，用(yong)酸浸泡可以滿足要求。

13. 銀染應盡(jin)快照(zhao)相，隨著時間延(yan)長，蛋白條帶會變淺，而(er)背景會加深。

14. 銀染(ran)容器理想(xiang)的是玻璃平皿，其次是搪瓷盤和(he)密胺(an)塑料盤等。

五、與PAGE凝膠快速(su)銀(yin)染試劑盒的相關產(chan)品：

P1305 考馬斯亮藍染色液

P1300-500 考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液

P0012 10×麗春紅染色液

PR1400 低分子量蛋白MARKER

PR1700 預染次高分子量蛋白MARKER

P1300 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒