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DEAE纖維素 DE-52 層析填料樹脂

DEAE-纖(xian)維素，它(ta)采用(yong)平均粒(li)徑(jing)為50µm的(de)(de)(de)顆粒(li)型親水高分子(zi)聚合物，表面又(you)用(yong)大分子(zi)糖鏈接枝，使它(ta)有更高的(de)(de)(de)比表面積(ji)和(he)更好的(de)(de)(de)生物兼容性，保(bao)持(chi)更高載量，同時又(you)具有更好的(de)(de)(de)分辨率。由于比表面積(ji)大，平衡和(he)洗脫的(de)(de)(de)時間也更短。它(ta)經過接枝即使是純化(hua)病(bing)毒，質粒(li)等超大分子(zi)的(de)(de)(de)物質，載量基(ji)本保(bao)持(chi)不變。

填料特征：

注意事項：

1、 色譜柱裝填

（1）所需要(yao)用到的(de)材(cai)料的(de)溫度要(yao)與色譜操作的(de)溫度一(yi)樣，液體做脫氣處理。填料可(ke)直接(jie)稱量需要(yao)的(de)量用緩沖液溶漲一(yi)小(xiao)時裝柱即可(ke)，如(ru)果(guo)不好溶脹，可(ke)適(shi)當加熱。

（2）在柱子(zi)(zi)下端加入(ru)20%乙醇(chun)(chun)，以(yi)(yi)除去(qu)柱子(zi)(zi)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)空氣(qi)，關閉柱子(zi)(zi)出口，在柱內保留(liu)少量的(de)(de)(de)20%乙醇(chun)(chun)。20%乙醇(chun)(chun)容(rong)易產生氣(qi)泡(pao)，可(ke)以(yi)(yi)在里面加1%吐溫避免氣(qi)泡(pao)產生。也(ye)可(ke)以(yi)(yi)換成純(chun)水(shui)(shui)裝柱子(zi)(zi)，但是需要(yao)把填(tian)料(liao)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)20%乙醇(chun)(chun)也(ye)換成純(chun)水(shui)(shui)，具(ju)體的(de)(de)(de)方(fang)法取需要(yao)體積(ji)的(de)(de)(de)填(tian)料(liao)在抽濾漏(lou)斗上進行，也(ye)可(ke)以(yi)(yi)小心傾去(qu)填(tian)料(liao)上的(de)(de)(de)20%乙醇(chun)(chun)，再(zai)換成5倍體積(ji)的(de)(de)(de)純(chun)水(shui)(shui)，反復沉淀(dian)去(qu)上清，5次左右就(jiu)可(ke)以(yi)(yi)用于(yu)裝柱子(zi)(zi)。

（3）此(ci)填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)顆粒比較細，所以一定(ding)要注意(yi)柱(zhu)子(zi)要選擇合適(shi)(shi)的篩(shai)網，不能漏，也可以取點填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)加到(dao)篩(shai)網上(shang)(shang)(shang)試(shi)試(shi)，如果(guo)沒(mei)有問題再將(jiang)填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)連續倒入(ru)柱(zhu)子(zi)時，要用(yong)玻璃棒的緊(jin)靠(kao)柱(zhu)子(zi)內壁引流，以減少(shao)氣泡的產生(sheng)，讓填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)先自然沉降到(dao)填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)體(ti)積(ji)不再變化(hua)，而(er)填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)和上(shang)(shang)(shang)面的液(ye)體(ti)很好分層，上(shang)(shang)(shang)層溶(rong)液(ye)*澄清，就可以開泵用(yong)適(shi)(shi)當的流速壓柱(zhu)子(zi)，填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)體(ti)積(ji)不再變化(hua)后，再把轉換頭緊(jin)頂在填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)(liao)上(shang)(shang)(shang)就可以平衡柱(zhu)子(zi)使(shi)用(yong)。使(shi)用(yong)的流速要小于(yu)裝柱(zhu)子(zi)的流速。

（4）在裝柱(zhu)子(zi)前，填(tian)料(liao)從冰箱(xiang)中取出少要(yao)室(shi)溫放置2-3個小時，這樣避免(mian)裝柱(zhu)子(zi)時由于溫度變化而使柱(zhu)子(zi)中產生氣泡。

2、 蛋白的結合

樣(yang)品的(de)鹽濃(nong)度和pH要(yao)盡量和平衡柱子的(de)緩沖液一致，鹽濃(nong)度過高或者pH帶(dai)低(di)也許(xu)掛不上，所以要(yao)根據自己的(de)樣(yang)品做適當調(diao)整。

3、 蛋白的洗脫

這個填(tian)料如(ru)果采用(yong)(yong)線(xian)(xian)性(xing)梯(ti)度(du)洗(xi)(xi)脫，柱(zhu)子的直(zhi)徑和高(gao)度(du)比是大于(yu)10，數值越大越有利于(yu)分離，而且樣(yang)(yang)品別上(shang)太(tai)多，可(ke)以按約10mg/ml上(shang)樣(yang)(yang)，如(ru)果采用(yong)(yong)階(jie)段(duan)洗(xi)(xi)脫的方法，裝短粗柱(zhu)子就可(ke)以，上(shang)樣(yang)(yang)量也沒有限制。階(jie)段(duan)洗(xi)(xi)脫容易放大，重(zhong)復性(xing)好(hao)，如(ru)果洗(xi)(xi)脫條(tiao)件好(hao)*可(ke)以得到和線(xian)(xian)性(xing)梯(ti)度(du)一(yi)樣(yang)(yang)或者更好(hao)。采用(yong)(yong)什么方法*根據自(zi)己(ji)需要。

4、 再生清洗

（1）用(yong)完之后用(yong)0.1M 醋酸洗5個柱體積，然后用(yong)2M NaCl洗5個床體積，再用(yong)水洗中性，然后用(yong)20%乙醇保存(cun)。

（2）有(you)機(ji)溶劑和水(shui)混合很(hen)容易產生氣泡，為了避免這樣情況，可(ke)以(yi)把配(pei)好的有(you)機(ji)溶劑在室溫放置(zhi)過夜，再使(shi)用，這樣可(ke)以(yi)避免氣泡進柱子而導致柱子不能(neng)正常使(shi)用。

特別注意：
上樣之前，樣品少用0.45微米膜過濾，盡量去除色素，否則色素會被吸附到填料上，影響填料的正常使用。
在使用過程中，不能使用強酸強堿(jian)，酸和(he)堿(jian)的濃(nong)度應(ying)低(di)于(yu)0.15摩(mo)爾。

相關文獻：

《Macrophage immunomodulatory activity of the cationic polymer modified PLGA nanoparticles encapsulating Alhagi honey polysaccharide》 作者:Adelijiang Wusiman,Jin He,Tianyu Zhu,Zhenguang Liu,Pengfei Gu,Yuanliang Hu,Jiaguo Liu,Deyun Wang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:
《Hypoglycemic activity and gut microbiota regulation of a novel polysaccharide from Grifola frondosa in type 2 diabetic mice》 作者:Yuqing Chen，Dan Liu，Dingyi Wang，Shanshan Lai，Ruting Zhong，Yuanyuan Liu，Chengfeng Yang，Bin Liu 期刊:Food and Chemical Toxicology 影(ying)響因子:3.977 PMID:30826407

DEAE纖維素 DE-52 層析填料樹脂