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Solarbio-總RNA提取試劑盒
操作步驟： 1. 樣品處理： a. 植物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混勻。
b. 動物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液，用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。 c. 貼壁細胞：直接在培養板中加入裂解液裂解細胞，每106細胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。 d. 細胞懸液：離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml裂解液混勻。 e. 血液處理：取0.2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細胞裂解液，混勻后室溫放置10分鐘，10000rpm離心1分鐘。棄上清，若沉淀含有紅細胞，可加入2倍體積紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml裂解液混勻。2. 將處理后的樣品在室溫放置5分鐘，使得核酸蛋白復合物*分離。3. 向勻漿樣品中加，蓋好管蓋，劇烈振蕩15秒，室溫放置3-5分鐘。
4. 2-8℃ 12000 rpm離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中，把水相轉移到新管中，不要吸到沉淀。
5. 吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)前處(chu)理：在吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)中(zhong)加(jia)(jia)入500ul 洗(xi)柱(zhu)液(ye)，室(shi)(shi)溫放(fang)置(zhi)2分鐘(zhong)，2-8 12,000 rpm℃離(li)(li)心(xin)2min，棄廢液(ye)。6. 第4步收集的上清中(zhong)加(jia)(jia)入200ul無水乙醇混勻(yun)，加(jia)(jia)入吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)靜置(zhi)2分鐘(zhong)，2-8 12000rpm℃離(li)(li)心(xin)2min，棄廢液(ye)。7. 向吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)中(zhong)加(jia)(jia)入600ul漂(piao)洗(xi)液(ye)(使用(yong)前請先檢查是否已(yi)加(jia)(jia)入無水乙醇)，2-8 12,000 rpm℃離(li)(li)心(xin)2min，棄廢液(ye)。8. 向吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)中(zhong)加(jia)(jia)入600ul漂(piao)洗(xi)液(ye)，2-8 12,000 rpm℃離(li)(li)心(xin)2min，棄廢液(ye)。9. 12000rpm離(li)(li)心(xin)2min，棄掉收集管，將(jiang)吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)置(zhi)于室(shi)(shi)溫放(fang)置(zhi)數(shu)分鐘(zhong)將(jiang)吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)中(zhong)殘余的漂(piao)洗(xi)液(ye)去除。10. 將(jiang)吸(xi)(xi)附(fu)柱(zhu)放(fang)入新管中(zhong)，向膜中(zhong)央滴加(jia)(jia)50-100ul RNase free ddH2O，室(shi)(shi)溫放(fang)置(zhi)5min，12000rpm室(shi)(shi)溫離(li)(li)心(xin)2min即得(de)到RNA。

Solarbio-總RNA提取試劑盒
注意事項： 1，所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品，操作過程要小心，帶口罩、手套避免環境中RNA酶污染樣品。
2，RNA在水(shui)溶(rong)液中OD值可能(neng)在1.5-1.9之間，但(dan)這并不表示RNA不純，需電(dian)泳檢測。

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