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氨基酸(AA)含量檢測試劑盒

動(dong)物(wu)(wu)肝(gan)臟、腎臟是氨(an)基(ji)(ji)酸(suan)(suan)代謝(xie)的(de)(de)主要(yao)器(qi)官，故(gu)尿中(zhong)氨(an)基(ji)(ji)酸(suan)(suan)的(de)(de)變(bian)(bian)化(hua)(hua)能(neng)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)肝(gan)、腎的(de)(de)生(sheng)理狀態。另(ling)外，氨(an)基(ji)(ji)酸(suan)(suan)還(huan)能(neng)反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)灼傷、傷寒等(deng)方面情況。植(zhi)物(wu)(wu)體內氨(an)基(ji)(ji)酸(suan)(suan)含(han)量對研究植(zhi)物(wu)(wu)在(zai)不同(tong)(tong)條件下(xia)及(ji)不同(tong)(tong)生(sheng)長(chang)發(fa)育時期氮(dan)代謝(xie)變(bian)(bian)化(hua)(hua)、植(zhi)物(wu)(wu)對氮(dan)素的(de)(de)吸(xi)收(shou)(shou)、運輸、同(tong)(tong)化(hua)(hua)及(ji)營養狀況等(deng)有重(zhong)要(yao)意義。氨(an)基(ji)(ji)酸(suan)(suan)的(de)(de) α-氨(an)基(ji)(ji)可與水合(he)茚三酮反(fan)(fan)應(ying)(ying)(ying)，產生(sheng)藍紫色(se)化(hua)(hua)合(he)物(wu)(wu)，在(zai) 570 nm 有特征吸(xi)收(shou)(shou)峰；通過測(ce)定 570 nm 吸(xi)光(guang)度，來計(ji)算氨(an)基(ji)(ji)酸(suan)(suan)含(han)量。

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一、樣品中氨基(ji)酸提(ti)取(qu)：稱取(qu)約(yue) 0.1g 組織，加(jia)試劑一 1mL，室溫(wen)下(xia)充分(fen)研磨，轉移到 1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分(fen)散失）置于(yu)沸水浴提(ti)取(qu) 15 min；自來水冷卻后，10000rpm，4℃離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清液，待測。

二(er)(er)、測定(ding)： 1. 分(fen)光光度計預熱 30 min 以上，調節波(bo)長到 570 nm，蒸餾(liu)水(shui)(shui)調零(ling)。 2. 在(zai) EP 管(guan)中加(jia)入(ru)下列試(shi)(shi)劑(ji)試(shi)(shi)劑(ji)名(ming)稱（μL）測定(ding)管(guan) 標準管(guan) 空白管(guan)樣(yang)本(ben) 10 — — 標準品(pin) — 10 — 蒸餾(liu)水(shui)(shui) — — 10 試(shi)(shi)劑(ji)二(er)(er) 100 100 100 試(shi)(shi)劑(ji)三(san) 100 100 100 試(shi)(shi)劑(ji)四 10 10 10 混勻后(hou)蓋緊瓶(ping)蓋（防(fang)止水(shui)(shui)分(fen)散失），置于沸水(shui)(shui)浴中保(bao)溫 15 min，冷卻后(hou)反復顛倒 EP 管(guan)數次(ci)，將 測定(ding)管(guan) 8000rpm 離(li)心 5min 后(hou)取上清(qing)，于 570nm 測定(ding)吸光值(zhi)。顯(xian)色后(hou)務必在(zai) 30min 內測完。

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計算（1）按蛋(dan)白(bai)(bai)濃度計算氨基酸(suan)含量（μmol /mg 蛋(dan)白(bai)(bai)）=[C 標準品(pin)(pin)×V 標準品(pin)(pin)×(A 測定－A 空(kong)白(bai)(bai))÷(A 標準－A 空(kong)白(bai)(bai))] ÷（Cpr×V 樣）=10×(A 測定－A 空(kong)白(bai)(bai))÷(A 標準－A 空(kong)白(bai)(bai)) ÷Cpr

（2）按(an)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)鮮(xian)重(zhong)計算氨基(ji)酸含(han)量（μmol /g 鮮(xian)重(zhong)）=[C 標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品(pin)×V 標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品(pin)×(A 測定－A 空(kong)白)÷(A 標(biao)(biao)(biao)準(zhun)－A 空(kong)白)]×（V 樣(yang)(yang)(yang)總 ÷V 樣(yang)(yang)(yang)）÷W=10×(A 測定－A 空(kong)白)÷(A 標(biao)(biao)(biao)準(zhun)－A 空(kong)白) ÷W C 標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品(pin)：標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品(pin)濃度，10 μmol/mL；V 標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品(pin)：反(fan)應體(ti)系中加入(ru)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品(pin)體(ti)積(ji)，0.01 mL；W：樣(yang)(yang)(yang)品(pin)質量，g；V 樣(yang)(yang)(yang)：反(fan)應體(ti)系中加入(ru)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)提取液體(ti)積(ji)，0.01 mL；V 樣(yang)(yang)(yang)總：樣(yang)(yang)(yang)品(pin)提取液總體(ti)積(ji)，1mL； Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL。