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技術服務案例分享|茶葉中茶氨酸的含量檢測


茶(cha)(cha)氨(an)酸(suan)(suan)(suan)(Theanine)是茶(cha)(cha)葉(xie)(xie)的(de)特征氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)(suan),也(ye)是茶(cha)(cha)葉(xie)(xie)呈味(wei)物(wu)質之一(yi),茶(cha)(cha)葉(xie)(xie)存在二十多(duo)種(zhong)氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)(suan)中,茶(cha)(cha)氨(an)酸(suan)(suan)(suan)約占(zhan)(zhan)茶(cha)(cha)葉(xie)(xie)氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)(suan)總量(liang)50%~60%,在鮮葉(xie)(xie)中茶(cha)(cha)氨(an)酸(suan)(suan)(suan)含量(liang)約占(zhan)(zhan)茶(cha)(cha)葉(xie)(xie)干重(zhong)的(de)1~2%。研究表明茶(cha)(cha)氨(an)酸(suan)(suan)(suan)具有抗(kang)氧化、調節(jie)免疫(yi)、延緩衰老(lao)等(deng)多(duo)種(zhong)生物(wu)活性。

某用(yong)戶制得兩種茶(cha)(cha)葉樣(yang)本,希望索萊寶代檢其中茶(cha)(cha)氨酸的(de)含量,作為(wei)評價(jia)樣(yang)本優劣的(de)指標之一(yi)。

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茶葉中茶氨酸(suan)經沸水加熱提取,凈(jing)化(hua)處理后,用高(gao)效(xiao)液相色譜儀進行(xing)測定(ding),用標準(zhun)品進行(xing)定(ding)性和(he)定(ding)量。



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由于樣本處理與檢測方法無需(xu)開發(fa),該樣本收到后(hou)次(ci)(ci)日(ri)即得檢測結果,報告于次(ci)(ci)日(ri)發(fa)予客戶(hu)。


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3.1.樣品信息

收到茶(cha)葉樣品兩個(ge),a和b。

3.2.材料與方法

所有(you)的(de)溶劑與試劑均為色譜級,茶氨酸標(biao)準品選用(yong)的(de)是索萊寶(bao)產(chan)品(ST8430  L-茶氨酸)。

3.3.樣品制備

茶氨酸提取方法

(1)茶葉(xie)樣品經磨碎(sui)混勻后,稱取1.0g(準確(que)至(zhi)0.01g)試樣;

(2)加沸蒸餾水(shui)(shui),置于100℃的(de)恒(heng)溫水(shui)(shui)浴鍋中浸提30min;

(3)0.45μm水相濾膜過濾,作為代測液(ye)備用;


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本實驗所用的(de)儀(yi)器為高效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi),配備紫外檢測器,色譜(pu)柱為C18 (250*4.6mm 5μm ),流(liu)動相(xiang)(xiang)A:純水,流(liu)動相(xiang)(xiang)B:乙(yi)腈,洗脫梯度如下:

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茶氨酸標準溶液:

分別將1mg/ml的(de)茶(cha)氨酸(suan)儲備(bei)溶液(ye)稀釋為對應濃(nong)度的(de)茶(cha)氨酸(suan)標準使用液(ye)。0.45μm水相(xiang)濾膜(mo)過濾。

 待流速和柱溫穩定(ding)(ding)(ding)后,進行空白運行,準(zhun)(zhun)確吸取一定(ding)(ding)(ding)量(liang)茶氨酸(suan)標準(zhun)(zhun)使(shi)用(yong)液注射入HPLC,在(zai)相同的(de)液相色(se)譜條件下注射同等量(liang)測試(shi)液,測試(shi)液以峰(feng)面(mian)積(ji)(ji)定(ding)(ding)(ding)量(liang),由色(se)譜峰(feng)的(de)峰(feng)面(mian)積(ji)(ji)可(ke)以從標準(zhun)(zhun)曲線上求出相應(ying)的(de)茶氨酸(suan)的(de)濃度,測試(shi)液中的(de)茶氨酸(suan)的(de)響應(ying)值均應(ying)在(zai)儀(yi)器測定(ding)(ding)(ding)的(de)線性范圍之內。

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茶氨酸 標準品


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樣本a


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樣本b



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茶葉中(zhong)(zhong)茶氨(an)酸含(han)量(liang)按式中(zhong)(zhong)計算:

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X—樣品中茶氨酸(suan)的含(han)量,單(dan)位為(wei)克(ke)每(mei)千克(ke)(g/kg)

c—樣品濃度(du),單位為毫克每毫升(mg/mL)

V—最后總定(ding)容后樣品的體積,單位(wei)為(wei)毫升(mL)

m—樣品的質量,單位為(wei)克(g)

w—樣品的(de)干物質含量(liang)(質量(liang)分數)%


標準曲線:

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綜上,可計算出a.b兩個茶葉樣本中,茶氨酸的具體(ti)含量(liang)。


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索萊寶提供的報告資料


1

詳細的實驗步驟

2

相關色譜參數

3

色譜圖片

4

液相色譜原始數據

5

計算得出的含量信息




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索萊寶基(ji)于自身(shen)搭建分(fen)析檢測平臺(tai),提供(gong)的(de)高效液相(xiang)色譜技術服務,可以快速、準確的(de)進行(xing)物(wu)質的(de)定(ding)性(xing)(xing)、定(ding)量(liang)分(fen)析。先進的(de)儀器設(she)備、專業的(de)技術團隊、嚴格的(de)執行(xing)標(biao)準,保(bao)障實驗方案的(de)科(ke)學性(xing)(xing)、穩定(ding)性(xing)(xing)、重復性(xing)(xing)。

服務項目主要包括:

1) HPLC方法(fa)學開發和驗證

2) 物質含量的(de)測定

3) 中藥(yao)指(zhi)紋圖譜研究

4) 藥(yao)(yao)物(wu)(天然產(chan)物(wu)/原料藥(yao)(yao)及其雜質(zhi))

    分(fen)離(li)純化

5) 物質結構(gou)確定

6) LC/LC-MS/NMR檢(jian)測(ce)



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