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玻璃紙透析培養觀察法

⑴ 玻(bo)(bo)璃(li)紙(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)選擇(ze)(ze)與處(chu)理(li):要選擇(ze)(ze)能夠允(yun)許營養物質透(tou)過的(de)(de)(de)玻(bo)(bo)璃(li)紙(zhi)(zhi)(zhi)。也可(ke)(ke)收集商品包裝用(yong)(yong)的(de)(de)(de)玻(bo)(bo)璃(li)紙(zhi)(zhi)(zhi),加水(shui)(shui)煮沸,然后用(yong)(yong)冷水(shui)(shui)沖洗。經此處(chu)理(li)后的(de)(de)(de)玻(bo)(bo)璃(li)紙(zhi)(zhi)(zhi)若變硬,必定(ding)是不可(ke)(ke)用(yong)(yong)的(de)(de)(de),只有那(nei)些軟的(de)(de)(de)可(ke)(ke)用(yong)(yong)。將那(nei)些可(ke)(ke)用(yong)(yong)的(de)(de)(de)玻(bo)(bo)璃(li)紙(zhi)(zhi)(zhi)剪成適(shi)當大小,用(yong)(yong)水(shui)(shui)浸濕后,夾于舊報紙(zhi)(zhi)(zhi)中(zhong),然后一起(qi)放入平皿內121℃滅菌30min備用(yong)(yong)。
⑵ 菌(jun)種的培養(yang):按無菌(jun)操作法(fa),倒(dao)平板(ban),冷凝后(hou)用(yong)滅(mie)菌(jun)的鑷子(zi)夾(jia)取無菌(jun)玻璃(li)紙貼(tie)附于平板(ban)上,再用(yong)接種環沾取少許霉(mei)菌(jun)孢(bao)子(zi),在玻璃(li)紙上方輕(qing)輕(qing)抖落于紙上。然后(hou)將(jiang)平板(ban)置28~30℃下培養(yang)3~5天,曲霉(mei)和(he)青(qing)霉(mei)即可在玻璃(li)紙上長(chang)出單個菌(jun)落(根(gen)霉(mei)的氣生性強,形成的菌(jun)落鋪滿整個平板(ban))。
⑶ 制片(pian)與觀(guan)察:剪取用玻璃紙(zhi)透析法培養3~4d 后長有(you)菌絲(si)和孢子的玻璃紙(zhi)一小塊,先(xian)放在(zai)50%乙(yi)醇中(zhong)浸(jin)一下(xia),洗(xi)掉脫落下(xia)來的孢子,并(bing)趕走菌體上(shang)的氣泡,然后正(zheng)面向(xiang)上(shang)貼附于干凈載玻片(pian)上(shang),滴(di)加1~2滴(di)乳酸石炭酸棉藍液,小心(xin)地(di)蓋上(shang)蓋玻片(pian),注(zhu)意不(bu)(bu)要產生氣泡,不(bu)(bu)要移動蓋玻片(pian),以(yi)免搞亂(luan)菌絲(si)。
標本(ben)片(pian)制(zhi)好后(hou),先(xian)用低倍鏡觀(guan)(guan)察,必要(yao)時再換高(gao)倍鏡。注(zhu)意(yi)觀(guan)(guan)察菌(jun)(jun)絲(si)有無(wu)隔膜,有無(wu)假(jia)根、足細(xi)胞(bao)等(deng)特(te)殊形(xing)態(tai)的(de)(de)菌(jun)(jun)絲(si)。注(zhu)意(yi)其無(wu)性繁殖(zhi)器官(guan)的(de)(de)形(xing)狀和構造,孢子著生的(de)(de)方式和孢子的(de)(de)形(xing)態(tai)、大小等(deng)。

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