過氧化氫(H2O2)含量檢測試劑盒 產(chan)品(pin)名稱:過氧化氫(H2O2)含量檢測試劑盒 產品英文名(ming):Micro Hydrogen Peroxide(H2O2) Assay Kit 產品貨號:BC3590 產地:北京市通州區馬駒(ju)橋聯東U谷8三樓(lou) 產品規格(ge):50管(guan)/48樣 產品商(shang)標:solarbio 保存與運輸:4℃保(bao)存或-20℃保(bao)存; 參考(kao)價(jia)格:190 庫存狀態:現貨 關鍵字:過氧化氫試(shi)劑盒
簡(jian)要介紹: H2O2是(shi)生物(wu)體(ti)內常見(jian)的(de)活(huo)性氧(yang)(yang)分(fen)子,主(zhu)要由SOD和XOD等(deng)催化產生,由CAT和POD等(deng)催化降解。H2O2不僅是(shi)重要的(de)活(huo)性氧(yang)(yang)之(zhi)一,也是(shi)活(huo)性氧(yang)(yang)相互(hu)轉化的(de)樞紐。一方面(mian),H2O2可以直接(jie)或間(jian)接(jie)地氧(yang)(yang)化細(xi)胞內核酸,蛋(dan)白質等(deng)生物(wu)大分(fen)子,并(bing)使細(xi)胞膜遭受損(sun)害,從而加速細(xi)胞的(de)衰老和解體(ti);另一方面(mian)H2O2也是(shi)許多氧(yang)(yang)化應急反(fan)應中(zhong)的(de)關鍵調節因子 產品詳(xiang)細(xi)描述 商品貨號: | 商品(pin)品(pin)牌(pai): | 規(gui)格(ge) | 基本(ben)售(shou)價: | 選擇(ze)規格 | BC3590-50管/48樣 | Solarbio | 50管(guan)/48樣 | 190.00元 | |
產(chan)品內容: 試(shi)劑一:丙tong 100mL×1 瓶,4℃保(bao)存(cun);(自備(bei)) 試(shi)劑二:粉劑×1 瓶,4℃保(bao)存;臨用前加(jia)入 3mL 濃鹽酸充(chong)分溶解(jie)備用。用不完的試(shi)劑 4℃保(bao)存; 試劑(ji)三:液體 6mL×1 瓶,4℃保存(cun); 試劑四:液體 30mL×1 瓶,4℃保存; 標(biao)準(zhun)品:液體 1mL×1 支(zhi),4℃保(bao)存,1mmol/mLH2O2標(biao)準(zhun)液。
產品說明(ming): H2O2是(shi)(shi)生(sheng)物(wu)體內(nei)常見的(de)活性(xing)(xing)氧(yang)分子(zi)(zi)(zi),主要(yao)由 SOD 和(he) XOD 等催(cui)(cui)化(hua)產生(sheng),由 CAT 和(he) POD 等催(cui)(cui) 化(hua)降解。H2O2不僅是(shi)(shi)重要(yao)的(de)活性(xing)(xing)氧(yang)之一(yi),也是(shi)(shi)活性(xing)(xing)氧(yang)相互(hu)轉(zhuan)化(hua)的(de)樞(shu)紐。一(yi)方(fang)面,H2O2可以(yi)直(zhi)接(jie)(jie)或(huo) 間接(jie)(jie)地氧(yang)化(hua)細(xi)胞內(nei)核(he)酸,蛋(dan)白(bai)質等生(sheng)物(wu)大分子(zi)(zi)(zi),并使細(xi)胞膜遭受(shou)損害,從而(er)加速(su)細(xi)胞的(de)衰老和(he)解體; 另一(yi)方(fang)面 H2O2也是(shi)(shi)許多(duo)氧(yang)化(hua)應急反應中的(de)關鍵(jian)調節(jie)因子(zi)(zi)(zi)。 H2O2與硫酸鈦生(sheng)成黃色的(de)過氧(yang)化(hua)鈦復(fu)合物(wu),在 415nm 有特(te)征吸收。
需自備的儀(yi)器和用品: 可見分光光度計/酶(mei)標儀、臺(tai)式離心(xin)機、可調(diao)式移液器、微(wei)量玻(bo)璃比色皿/96 孔板、丙tong、濃鹽 酸、研缽和冰。
操作步驟: 一、H2O2提取: 1、細(xi)(xi)(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)(xi)(xi)胞樣(yang)品的制備: 收集細(xi)(xi)(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)(xi)(xi)胞到離心(xin)(xin)管內(nei),離心(xin)(xin)后棄上清;按照每 500 萬細(xi)(xi)(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)(xi)(xi)胞加(jia)入 1mL 試劑一,超聲(sheng) 波(bo)破碎細(xi)(xi)(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)(xi)(xi)胞(功(gong)率 20%,超聲(sheng) 3s,間(jian)隔 10s,重(zhong)復 30 次);8000g4℃離心(xin)(xin) 10min,取上清, 置冰上待(dai)測。 2. 組織樣品的制(zhi)備(bei): 稱取(qu)約(yue) 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一進行冰(bing)(bing)浴勻漿(jiang);8000g4℃離心 10min,取(qu)上清,置(zhi)冰(bing)(bing)上待 測。 3、血清(漿(jiang))樣品(pin):按照每(mei) 100μL 血清(漿(jiang))加入 0.9mL 試劑一的(de)比例充(chong)分混勻;8000g4℃離心 10min,取(qu)上(shang)清,置冰上(shang)待測。 注(zhu)意事(shi)項: 1、由于(yu)試劑一易揮發,試劑一必須先預冷(leng)再加,研磨時必須在冰上研磨。 2、本(ben)試(shi)劑(ji)盒中試(shi)劑(ji)的揮發性(xing)較高,請(qing)帶一次性(xing)手(shou)套(tao)和(he)口罩。
二、測定步(bu)驟: 1、分光(guang)光(guang)度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長(chang) 415nm,蒸餾水調零。 2、將(jiang)試劑二、三和四 37℃(哺(bu)乳(ru)動(dong)物)或(huo) 25℃(其(qi)它物種(zhong))水浴(yu) 10min 以上。 3、如果用(yong)(yong)(yong) 96 孔板將則(ze)用(yong)(yong)(yong)丙tong將 1mmol/mL 標準(zhun)液稀(xi)釋為(wei) 2μmol/mL 的標準(zhun)溶液,用(yong)(yong)(yong)微量玻璃比色 則(ze)用(yong)(yong)(yong)丙tong將 1mmol/mL 標準(zhun)液稀(xi)釋為(wei) 1μmol/mL 的標準(zhun)溶液。 4、在 EP 管中按順序加入下列試劑 試劑名稱(μL)
試劑(ji)名稱(μL) | 測定管 | 標準管 | 對照(zhao)管(guan) | 樣本 | 250 | | | 標準溶液 | | 250 | | 試劑一 | | | 250 | 試(shi)劑二 | 25 | 25 | 25 | 試劑三(san) | 50 | 50 | 50 | 4000g,常溫(wen)離心 10min,棄上(shang)清(qing),留沉淀(dian) | 試劑(ji)四 | 250 | 250 | 250 |
加(jia)入試劑(ji)四(si)溶解沉淀后(hou)(可先用丙(bing)tong清洗 3-5 次來洗去植(zhi)物色(se)素),室溫靜置 5min,取 200μL 轉移微量玻(bo)璃比色(se)皿或 96 孔(kong)板中測定 415nm 處(chu)吸(xi)光值。對照管(guan)只要做一次即(ji)可。計算?A 測定(ding)(ding)=A 測定(ding)(ding)管-A 對照管,?A 標準=A 標準管-A 對照管。
三、H2O2含量計算: 1、按照細(xi)菌(jun)、細(xi)胞數(shu)量(liang)(liang)計算(suan): H2O2含量(liang)(liang)(μmol/104cell)=?A 測定÷(?A 標(biao)準÷C 標(biao)液)×V 樣本÷(500×V 樣本÷V 提取) =0.004×?A 測定÷?A 標準(zhun)。 2、按組(zu)織(zhi)鮮重計算(suan): H2O2含量(μmol/g 鮮重)=?A 測(ce)定÷(?A 標(biao)準÷C 標(biao)液)×V 樣(yang)本(ben)÷(V 樣(yang)本(ben)÷V 提取(qu)×W) =2×?A 測定÷?A 標準÷W。 3、按照蛋白濃度(du)計算: H2O2含量(μmol/mgprot)=?A 測定÷(?A 標準÷C 標液(ye))×V 樣本(ben)÷(Cpr×V 樣本(ben)) =2×?A 測(ce)定÷?A 標準÷Cpr。 4、按血(xue)清(qing)(漿(jiang))體積計算: H2O2含量(μmol/mL)=?A 測定(ding)÷(?A 標準÷C 標液)×10 =20×?A 測定÷?A 標(biao)準。 500:細胞或細菌總數,萬個;C 標(biao)液(ye):H2O2標(biao)準溶液(ye)濃度,2μmol/mL;V 樣本:加入的樣本 體積(ji),0.25mL;W:組織鮮(xian)重(zhong),g;V 提取:提取過程中所用體積(ji),1mL;Cpr:樣品蛋(dan)白濃度,mg/mL; 10:血(xue)清稀釋倍數,[0.1mL 血(xue)清(漿(jiang))+0.9mL 試(shi)劑(ji)一]÷0.1mL 血(xue)清(漿(jiang))=10。
注(zhu)意:如果用微(wei)量(liang)玻璃比色皿(光徑(jing) d=1cm)將 1mmol/mL 標(biao)準(zhun)液稀釋(shi)為 1μmol/mL 的標(biao)準(zhun)溶液。 計算公式亦作改變。
相關文獻: 《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: 《The Combination of piR-823 and Eukaryotic Initiation Factor 3 B (EIF3B) Activates Hepatic Stellate Cells via Upregulating TGF-β1 in Liver Fibrogenesis》 作者:Xuechan Tang,Xiaoli Xie,Xin Wang, Yan Wang,Xiaoyu Jiang, and Huiqing Jiang 期刊:International Medical Journal of Experimental 影響因子:1.42 PMID:30556540 《Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense》 作者:Ying Zhao,Wengang Yu,Xiangyu Hu,Youhai Shi,Yu Liu,Yunfang Zhong,Peng Wang,Shuya Deng,Jun Niu,Xudong Yu 期刊:Gene 影響因子:2.638 PMID:29604462 《Heterologous Expression of Salvia miltiorrhiza MicroRNA408 Enhances Tolerance to Salt Stress in Nicotiana benthamiana》 作者: Xiaorong Guo, Junfeng Niu * and Xiaoyan Cao 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30544912 《Decreasing fructose 1,6-bisphosphate aldolase activity reduces plant growth and tolerance to chilling stress in tomato seedlings》 作者:Bingbing Cai, Qiang Li, Fengjiao Liu, Huangai Bi and Xizhen Ai 期刊:Physiologia Plantarum 影響因(yin)子:3 PMID:29230823 |