乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測試劑盒 產品名稱:乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測試劑盒產品英文名: Acetaldehyde Dehydrogenase (ALDH)Assay Kit產品貨號:BC0750 產地:北京市通州區(qu)馬駒橋(qiao)聯(lian)東U谷8三樓(lou)產品(pin)規格:50管/48樣 產品商標:solarbio 保存與運輸(shu):4℃保存或-20℃保(bao)存(cun); 參(can)考價格(ge):760 庫(ku)存狀態(tai):現(xian)貨 關鍵字:乙(yi)醛(quan)脫氫(qing)酶(mei)試劑盒(he)|活(huo)性檢測試劑盒| ALDH活性檢測(ce)|試劑盒
簡要介紹: 乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫酶(mei)(mei)(mei) (EC 1.2.1.10)是醛脫(tuo)(tuo)氫酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)一種,廣泛(fan)存在(zai)(zai)于各種動(dong)物、植物和(he)微生(sheng)物體內。主要作用是將乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛氧化(hua)(hua)成(cheng)乙(yi)(yi)(yi)(yi)酸,在(zai)(zai)酒精代謝(xie)中起主要作用。在(zai)(zai)人類和(he)許多(duo)動(dong)物體內,線粒體乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫酶(mei)(mei)(mei)能把對(dui)生(sheng)物體有害的(de)(de)醇類轉化(hua)(hua),所以在(zai)(zai)細胞解毒(du)研(yan)究中乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫酶(mei)(mei)(mei)受到(dao)高度關(guan)注;同時,乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫酶(mei)(mei)(mei)在(zai)(zai)分子生(sheng)物學以及相關(guan)疾病的(de)(de)檢測方面(mian)有較廣泛(fan)的(de)(de)研(yan)究應(ying)用。在(zai)(zai)輔酶(mei)(mei)(mei)Ⅰ存在(zai)(zai)的(de)(de)條件下,乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫酶(mei)(mei)(mei)催化(hua)(hua)乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛和(he)NAD+轉化(hua)(hua)為乙(yi)(yi)(yi)(yi)酸和(he)NADH,在(zai)(zai)340nm 處(chu)的(de)(de)吸(xi)光(guang)值會(hui)增加,測定(ding)340nm 處(chu)的(de)(de)吸(xi)光(guang)值變化(hua)(hua),可(ke)計(ji)算得到(dao)乙(yi)(yi)(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)活性。
產品詳細描述 商品貨號: | 商(shang)品品牌(pai): | 規格 | 基(ji)本(ben)售價: | 選擇(ze)規格(ge) | BC0750-50管/48樣 | Solarbio | 50管/48樣(yang) | 760.00元 | |
產品內容: 提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存。 試劑一:液體15mL×1 瓶,4℃保(bao)存(cun)。 試劑二:液(ye)體(ti)5mL×1 瓶,4℃避(bi)光保存。 試劑三(san):液(ye)體(ti)3mL×1 瓶,4℃避光保存。 試(shi)劑(ji)四(si):液體2mL×1 支,4℃保存(cun)。 試(shi)劑五:液體2mL×1 支(zhi),4℃保存(cun)。
產品說明: 乙(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫(qing)(qing)酶(mei)(mei) (EC 1.2.1.10)是(shi)醛脫(tuo)(tuo)氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)的(de)(de)(de)一種,廣泛(fan)存在(zai)于各種動物(wu)、植物(wu)和(he)微生(sheng)物(wu)體(ti)內。主要 作用是(shi)將乙(yi)(yi)醛氧化成乙(yi)(yi)酸(suan),在(zai)酒精代謝中起(qi)主要作用。在(zai)人類(lei)和(he)許多動物(wu)體(ti)內,線粒體(ti)乙(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫(qing)(qing)酶(mei)(mei) 能(neng)把對生(sheng)物(wu)體(ti)有害(hai)的(de)(de)(de)醇類(lei)轉化,所以在(zai)細(xi)胞解毒研究(jiu)(jiu)中乙(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)受到高度關(guan)(guan)注;同時,乙(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫(qing)(qing) 酶(mei)(mei)在(zai)分子生(sheng)物(wu)學以及(ji)相(xiang)關(guan)(guan)疾病的(de)(de)(de)檢(jian)測方面有較廣泛(fan)的(de)(de)(de)研究(jiu)(jiu)應用。 在(zai)輔(fu)酶(mei)(mei)Ⅰ存在(zai)的(de)(de)(de)條件下,乙(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)催化乙(yi)(yi)醛和(he)NAD+轉化為乙(yi)(yi)酸(suan)和(he)NADH,在(zai)340nm 處(chu)(chu)的(de)(de)(de)吸 光值(zhi)會(hui)增加,測定340nm 處(chu)(chu)的(de)(de)(de)吸光值(zhi)變化,可計算得到乙(yi)(yi)醛脫(tuo)(tuo)氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)的(de)(de)(de)活性。 自(zi)備(bei)實驗用品及(ji)儀器(qi): 天平、離心機(ji)、恒溫水浴鍋、紫外分光(guang)光(guang)度(du)、1mL 石英(ying)比色皿、蒸餾水。
操(cao)作步驟: ALDH 提取:
- 組織:
按照組織(zhi)質量(g):提取(qu)液體(ti)積(mL)為 1:5-10 的比例(li)(建議稱取(qu)約 0.1g 組織(zhi),加入 1mL 提取(qu)液),進行冰浴勻漿。12000rpm, 4℃離心 20 分鐘。 - 細(xi)胞:
按照細(xi)胞數量(10 4個(ge)):提(ti)取(qu)液體積(mL)為 500-1000:1 的比例(建議 500 萬細(xi)胞加入(ru) 1mL 提(ti)取(qu)液),冰浴(yu)超聲波破(po)碎細(xi)菌(jun)或細(xi)胞(功率(lv) 30%或 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒。總(zong)時(shi)間 3min);10000rpm, 4℃離(li)心 10 分鐘,取(qu)上清,置冰上待測。
測(ce)定操作 | 對(dui)照管 | 測定管 | 樣本(mL) | | 0.2 | 試劑(ji)一(yi)(mL) | 0.3 | 0.3 | 試劑二(mL) | 0.1 | 0.1 | 試劑(ji)三(mL) | 0.05 | 0.05 | 試劑四(mL) | 0.03 | 0.03 | 試劑五(mL) | 0.02 | 0.02 | H2O(mL) | 0.5 | 0.3 |
充分混(hun)勻,1mL 石英(ying)比色皿,對照管(guan)調零,于(yu)340nm 處(chu)(chu)測定(ding)吸(xi)光(guang)值A1,迅速置于(yu)37℃水浴1min, 于(yu)340nm 處(chu)(chu)測定(ding)吸(xi)光(guang)值A2,△A= A1-A2。 ALDH 酶(mei)活(huo)計算 - 按(an)蛋(dan)白濃度計算
酶活定義:每(mei)毫克(ke)蛋白每(mei)分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為 1U。 ALDH 酶活(U/mg prot)=△A/(e× d) ×V反(fan)總(zong)÷(V樣×Cpr)÷T=0.804×△A÷Cpr - 按樣本質量計算
酶(mei)活定義:每克蛋白(bai)每分鐘催(cui)化還原1μmol NAD+的酶(mei)量(liang)為(wei) 1U。 ALDH 酶活(huo)(U/g)=△A/(e× d) ×V反總÷(V樣×W÷V樣總)÷T=0.804×△A÷W - 按(an)照細胞數量計(ji)算
酶活定(ding)義:每10 4個細胞每分鐘(zhong)催化還原(yuan)1μmol NAD+的酶量(liang)為 1U。 ALDH 酶活(U/10 4 cell)=△A/(e× d) ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量(萬個))÷T=0.804×△A÷ 細胞數量(萬個) e :NADH 微摩爾消光系數,6.22×10-3 L/μmol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應體系總 體積,1mL;V 樣:反應體系中樣本體積,0.2mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量, g;T:反應時間:1min。
相關文獻: 《Untangling the response of bone tumor cells and bone forming cells to matrix stiffness and adhesion ligand density by means of hydrogels》 作者:Tongmeng Jiang,Jinmin Zhao,Shan Yud,Zhengwei Mao,Changyou Gao,Ye Zhu,Chuanbin Mao,Li Zheng 期刊:Biomaterials 影響因子:10.273 PMID:30343256 《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者(zhe):Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin 期(qi)刊:Biotechnology for Biofuels 影響因(yin)子(zi):5.452 PMID: |